王磊 翁小东 陈志远 刘修恒

    [摘要] 目的 探讨青蒿虎酯对大鼠睾丸扭转复位后缺血再灌注损伤的影响。 方法 采用随机数字表法将18只成年健康雄性SD大鼠分为对照组、缺血组和青蒿虎酯组，每组6只，建立睾丸扭转复位动物模型(720°维持2 h)。青蒿虎酯组于术前3 d灌胃青蒿琥酯25 mg/(kg·d)，对照组和缺血组灌胃同体积蒸馏水。复位后4 h处死大鼠并获取睾丸组织，分别检测组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)含量，采用HE染色和TUNEL染色检测组织病理学参数和生精细胞凋亡指数(AI)。Western blot检测各组睾丸组织多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)-1和凋亡诱导因子(AIF)的表达。 结果 与对照组比较，缺血组和青蒿虎酯组SOD活性和曲细精管直径明显降低，而MDA含量、凋亡指数、PARP-1和AIF表达则显著升高，差异有统计学意义(P 99%，批号：ZA080203);多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)-1(sc-53643)、凋亡诱导因子(AIF)(sc-55519)抗体购于santacruz公司;BCA蛋白浓度试剂盒(P0012)购于碧云天生物技术研究所;超氧化物歧化酶(SOD)(A001-3)、丙二醛(MDA)(A003-1)检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所。

    1.3 模型的建立与分组

    采用随机数字表法将实验大鼠分为对照组、缺血组和青蒿虎酯组，每组6只。各组大鼠麻醉成功后取下腹切口，游离左侧睾丸并切断睾丸引带，分离至附睾头。对照组：将睾丸顺时针扭转720°后立即复位固定，关闭切口。缺血组和青蒿琥酯组：顺时针扭转720°并维持2 h，其间夹闭切口，后将睾丸复位固定，睾丸由暗红色变鲜红色代表造模成功。术前3 d灌胃青蒿琥酯25 mg/(kg·d)，单次给药。对照组和缺血组灌胃同体积蒸馏水。

    1.4 样本采集和处理

    1.4.1 标本采集? 各组大鼠复位4 h后处死，获取的睾丸组织一部分置于液氮中保存，另一部分用固定液固定，常规石蜡包埋后检测组织病理学改变和生精细胞凋亡指数。

    1.4.2 SOD活力和MDA含量检测? 获取各组大鼠睾丸组织后，取50 mg组织 ......