靳丽丽 郄涛 张同乐

    [摘要] 目的 观察前列地尔对急性力竭大鼠心肌细胞缺血及凋亡的影响。 方法 将24只雄性SD大鼠(SPF级)按随机数字表法分为对照组、力竭组、低剂量前列地尔预处理力竭组(前列地尔低剂量组)、高剂量前列地尔预处理力竭组(前列地尔高剂量组)。前列地尔低剂量组、前列地尔高剂量组分别给予前列地尔5、10 μg/(kg·d)腹腔注射7 d，对照组、力竭组给予0.9% NaCl 2 mL/(kg·d)腹腔注射7 d。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测缺血修饰白蛋白(IMA)。对大鼠心肌细胞进行TUNEL检测并观察计算凋亡指数(AI)。免疫组化法检测大鼠心肌Bax、Bcl-2含量。Western blot法检测大鼠心肌Fas、Caspase-3、Caspase-9含量。 结果 ①力竭运动大鼠血清IMA含量显著升高。与力竭组比较，前列地尔低剂量组和前列地尔高剂量组IMA明显降低(P 0.05)，前列地尔高剂量组较力竭组和前列地尔低剂量组明显下降(P 0.05). Compared with group E and group L， AI of group H decreased significantly (P 10 s。②大鼠失去协调运动，在水中无方向性乱窜，即使没有达到10 s也可以定义为力竭。如大鼠短时间就出现力竭，将其从水中捞出休息5 min，继续使之游泳，确保其游泳时间至少2 h。密切观察大鼠游泳过程，防止呛水而致其意外死亡)。大鼠的力竭游泳槽为清洁塑料圆桶(60 cm×55 cm×50 cm)。水温为32℃(上下浮动不超过1℃)。

    1.3.2 血清及心肌标本采集及制备 对照组及力竭运动后的大鼠立即行戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔麻醉，开胸下腔静脉取血，3000 r/min，离心20 min，-80℃保存备用。取血后迅速将大鼠心脏取出，冷生理盐水洗净，迅速称重。在心尖部心室前壁肌切取200 mg心肌组织，在4%多聚甲醛中固定24 h后，用梯度浓度酒精行常规脱水、二甲苯透明，石蜡包埋后组织切片，6～8张，厚度为4 μm，用涂有多聚赖氨酸的载玻片贴片，56℃烘烤40 min备用。剩余心肌-80℃保存备用。

    1.3.3 ELISA检测血清IMA含量 按照试剂盒操作具体步骤，测定每组血清中IMA含量，用酶标仪检测各孔450 nm处的OD值及标准品的OD值 ......