刘梦丹 冀琳琳 叶阳 祝超瑜 肖元元 高清歌 魏丽

    [摘要] 目的 觀察db/db小鼠肝组织和高糖对待的肝癌细胞株HepG2细胞中胰高血糖素受体(GCGR)的表达及作用的变化。 方法 db/db小鼠和对照小鼠均进行腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)和腹腔注射胰岛素耐量试验(IPITT)，收集两组小鼠的血液进行生化指标检测;采用Western blot或免疫组化法检测两组小鼠肝脏中GCGR、蛋白激酶A(PKA)、磷酸化蛋白激酶A(p-PKA)的表达情况。采用Western blot法检测在无胰高血糖素(GLN)刺激下，不同糖浓度或不同时间梯度高糖(30 mmol/L)处理的HepG2细胞GCGR的表达情况，以及在GLN刺激下，不同时间梯度高糖处理的HepG2细胞GCGR、PKA、p-PKA蛋白的表达情况。 结果 与对照小鼠比较，db/db小鼠肝脏GCGR表达增加，而PKA磷酸化水平下降(P 0.05)。与对照小鼠(1.82±0.07)比较，db/db小鼠p-PKA蛋白表达水平(1.12±0.08)降低，差异有统计学意义(P < 0.05)。与对照小鼠p-PKA/PKA水平(1.33±0.16)比较，db/db小鼠p-PKA/PKA水平(0.78±0.02)降低，差异有高度统计学意义(P < 0.01)。见图3。

    2.4 葡萄糖对无GLN刺激下HepG2细胞GCGR蛋白表达影响的浓度和时间效应

    与5.6 mmol/L葡萄糖浓度的对照组比较 ......