万俊锋 阳 波 郑佳状 冉茂波 宋昭君

    四川省遂宁市中心医院骨科，四川遂宁 629000

    细胞外基质蛋白合成的减少以及降解的增加是椎间盘退变的主要特征，这种分解代谢平衡的破坏进一步引起椎间盘组织结构的变化，最终导致椎间盘无法承受生理载荷，失去应有的稳定性，从而导致患者发生脊柱退行性改变[1-3]。因此找到合适的治疗方式抑制髓核细胞外基质的降解，从而延缓椎间盘退变已成为目前的研究热点。

    姜黄素(Curcumin)是一种在我国种植的草本植物，许多研究[4-7]表明，姜黄素具有抗炎、抗凋亡和抗氧化应激等作用。研究发现姜黄素可以通过激活ERK通路促进软骨细胞的自噬从而抑制其凋亡[8]，以及姜黄素可以通过抑制NF-κB 通路从而提高软骨细胞外基质Ⅱ型胶原的合成和降低基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达[9]。但是姜黄素在椎间盘中的作用目前还很少研究，因此本实验初步探讨姜黄素对人椎间盘髓核细胞退变和自噬的相关研究。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    人椎间盘髓核组织取自遂宁市中心医院(以下简称“我院”)骨科收治的椎间盘突出的7 例患者，男4 例，年龄56～78 岁，女3 例，年龄61～76 岁。与患者及家属签订知情同意书，并获得我院医学伦理委员会批准。按照Pfirrmann 等[10]的分级标准对所获得的椎间盘组织进行分级，为Ⅳ～Ⅴ级。排除恶性肿瘤和神经系统病史，术后病理检查结果均为退变的椎间盘组织。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司；姜黄素、微管相关蛋白3(LC3)B抗体和Beclin 1 抗体均购自美国Sigma 公司；GFPLC3 腺病毒购自上海汉恒生物科技有限公司；MMP-3和MMP-13 抗体购自美国Cell Signaling Technology公司；聚集蛋白聚糖(aggrecan)抗体、β-actin 抗体和二抗均购自武汉博士德公司；胶原蛋白(Collagen)Ⅱ抗体购自美国SAB 公司 ......