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编号:1356103
高通量测序技术检测非典型子宫内膜增生疾病微小RNA 的差异表达
http://www.100md.com 2019年11月22日 中国医药导报 2019年第30期
文库,1对象与方法,1研究对象,2研究方法,3统计学方法,2结果,1smallRNA文库表达情况,2miRNA及相应靶基因情况,3差异miRNA分析,4差异miRNA靶基因的富集分析,5差异miR
     唐世倩 褚春芳 李 婷 郑 萍 周 琦 刘菊红 王 玉

    首都医科大学附属北京妇产医院妇科,北京 100026

    非典型子宫内膜增生(atypical endometrial hyperplasia,AEH)疾病被认为是子宫内膜癌的癌前病变,在雌激素持续作用下,最终可进展为子宫内膜癌[1],目前AEH 的发病机制并不完全清楚。大量研究发现,AEH 疾病存在着多种基因的异常表达,提示AEH 是由多种基因共同参与的、复杂的生物演变过程[2]。

    微小RNA(microRNA,miRNA)是一种小分子RNA,它可通过影响目标mRNA 的稳定性及翻译,参与细胞周期、分化、生长、新陈代谢等多个生物过程的调控[3],现已证实多种miRNA 参与机体内肿瘤的形成,并发挥巨大调节作用,但其在AEH 中的作用目前尚不清楚。为了探索miRNA 在AEH 中的作用,本研究采用高通量测序技术筛选正常人群与AEH 患者子宫内膜的差异miRNA,并进行生物学分析,了解差异miRNA 在AEH 中作用及机制。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象

    收集2016 年1 月~2017 年1 月在首都医科大学附属北京妇产医院(以下简称“我院”)就诊的3 例AEH患者(实验组)及3 名正常女性(对照组)的子宫内膜组织标本,年龄25~40 岁。实验组平均年龄(36.33±1.86)岁,平均体重指数(BMI)(24.31±1.42)kg/m2;对照组平均年龄(30.00±2.89)岁,平均BMI(18.25±1.36)kg/m2。两组年龄、BMI 比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

    实验组样本选自经诊断性刮宫术,术后病理证实为AEH 内膜组织的患者;对照组样本选自同期行诊断性刮宫术,术后病理证实为正常增生期子宫内膜的女性。所有研究对象既往均未使用激素药物治疗,且无甲状腺、子宫肌瘤、恶性肿瘤、糖尿病、多囊卵巢综合征等病史。所有研究对象均签署知情同意书,本研究经我院医学伦理委员会批准。

    1.2 研究方法

    用生理盐水洗涤两组诊断性刮宫术后得到的内膜组织标本,置EP 管中,液氮快速冷冻后,-80℃冰箱保存待测。根据术后病理结果挑选符合要求的组织标本,将实验组与对照组配对。

    1.2.1 总RNA 提取及文库构建 总RNA 提取及文库构建由深圳华大基因科技有限公司完成 ......

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