兰海霞 春 英 呼格吉乐

    1.解放军第九六九医院儿科，内蒙古呼和浩特 010051；2.内蒙古医科大学附属医院检验科，内蒙古呼和浩特 010059

    新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)，是指在围生期发生宫内窘迫、产期窒息，引起的部分或完全缺氧、脑血流减少或者暂停，导致新生儿脑组织中枢神经损伤，发病率、死亡率较高。有研究发现促红细胞生成素(EPO)除促进红细胞生成外还可以发挥神经保护作用。EPO是一种含有唾液酸的糖蛋白激素，与促红细胞生成素受体(EPOR)结合，对神经系统发挥保护作用[1]。近年来EPO 逐渐开始发展成为治疗各种神经系统疾病的有效药物[2]，如缺氧缺血性脑病、癫痫、阿尔茨海默病、帕金森病、创伤性脑损伤和糖尿病神经病变等[3-7]。在缺血性脑损伤后，低氧的刺激使脑组织内EPO 和EPOR 表达增高[8-10]，尤其是对新生儿缺氧缺血性脑病造成的脑损伤及远期神经预后可能有改善的作用[11]。EPO 对缺氧缺血性脑病的作用是多基因共同作用的结果，目前研究结果尚不一致[12]，而且未在转录水平进行深入研究。本实验通过应用氯化钴(CoCl2)来构建U251 细胞的缺氧模型，并对缺氧模型进行评价，探讨EPO 对缺氧U251 细胞增殖能力的影响，以及EPO 对BMI1 基因在转录水平的影响，为研究EPO 在新生儿缺氧缺血性脑病中的神经保护作用机制奠定基础。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    胶质瘤U251 细胞购自中国医学科学院上海细胞库，MEM 培养基(Gibco 公司，批号：8118247)；DPBS(Gibco 公司，批号：8117130)；0.25%胰蛋白酶(Gibco 公司，批号：1854874)；EPO(北京四环生物制药公司，批号：20180330)；RNA 反转录试剂盒(TOYOBO 公司 ......