焦志华 步莉娜 陈军 邹锋 欧阳元明

    [摘要] 目的 观察脓毒症急性肾损伤小鼠肾组织炎性因子的变化规律并探讨衣康酸对脓毒症小鼠炎性因子的影响以及对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肾损伤的保护作用。 方法 雄性C57BL/6小鼠24只，根据随机数字表法将其分为三组：空白对照组、LPS组、衣康酸+LPS组，每组各8只。衣康酸+LPS组腹腔给予50 mg/kg衣康酸，空白对照组和LPS组腹腔给予等量生理盐水。给药2 h后，空白对照组注射等量的生理盐水，其他两组小鼠腹腔注射LPS(10 mg/kg)。24 h后，麻醉小鼠，留取肾组织备用。肾组织切片苏木精-伊红染色观察肾损伤程度。酶联免疫吸附试验法检测血浆中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化。Western blot法检测肾组织中细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、P38和P65蛋白的磷酸化程度。結果 LPS处理24 h后，LPS组肾损伤评分，髓过氧化物酶活性，血浆中IL-1β、IL-6和TNF-α水平，肾组织中ERK、JNK、P38和P65蛋白磷酸化水平均高于对照组，差异有统计学意义(P 25%～50%;3分：肾小管受损面积 >50%～75%;4分：肾小管受损面积>75%～100%。

    1.6 ELISA法检测血浆中炎性因子的变化

    按照TNF-α、IL-1β和IL-6 ELISA检测试剂盒说明书完成以下步骤：①标准品的稀释与加样;②加样;③温育;④配液;⑤洗涤;⑥加酶;⑦温育、洗涤;⑧显色;⑨终止;⑩测定并计算 ......