王蔚 周忠光 杨婧 刘旭 田明 乔羽 仲丽丽

    [摘要] 目的 研究樺褐孔菌醇提物(IO醇提物)对胃癌BGC-823裸鼠移植瘤的抑制作用，推测其作用机制与PI3K/AKT通路相关性。 方法 48只裸鼠使用异位移植瘤造模法建立胃癌模型，造模后按照随机数字法分为IO醇提物高剂量组(3 mg/g)、中剂量组(1 mg/g)、低剂量组(0.75 mg/g)，阴性对照组(羧甲基纤维素钠灌胃)，模型组(不灌药物)，阳性对照组(卡培他滨灌胃，0.5 mg/g)，每组各8只。灌胃14 d，处死小鼠，剥离肿瘤组织，称重计算抑瘤率;光镜和电镜下观察药物干预后肿瘤组织形态变化;免疫组织化学法检测相关蛋白4E-BP1、p27kip1、Bcl-2、Bax、caspase-3的表达;逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测磷酸酶基因(PTEN)、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)、蛋白激酶(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定PI3K、p-AKT蛋白表达。 结果 与阴性对照组、模型组比较，各IO醇提物组肿瘤重量降低(P 90%);胎牛血清、RPMI-1640、胰酶、山羊血清、抗体(6 mL，北京中杉金桥生物公司);Western blot试剂(碧云天生物技术有限公司，P0013);RT-PCR试剂盒[宝日医生物技术(北京)有限公司，DRR037]。CO2培养箱(日本SANYO公司);酶标分析仪(南京德铁实验设备有限公司);紫外分光光度计(日本岛津，UV-2401);荧光定量(美国ABI，PCR7500);PageRulerTM Prestained Protein Ladder(美国Thermo公司，26616)。

    1.3 实验分组与处理

    选取雄性裸鼠，4～6周龄，体重20 g左右，在SPF级动物房内72 h适应性饲养 ......