王顺民 杨晓丹 曾勇

    [摘要] 目的 探討利血平与大鼠主动脉血管平滑肌细胞(RA-VSMC)自噬的关系。 方法 用含利血平或者厄尔平衡盐缓冲液(EBSS)培养基体外培养RA-VSMC，MTT法检测对照组、5 μmol/L利血平组、10 μmol/L利血平组、20 μmol/L利血平组、50 μmol/L利血平组RA-VSMC的细胞活力;mRFP-GFP-LC3双荧光体系示踪RA-VSMC的自噬小体;实时荧光定量PCR(qPCR)以及蛋白免疫印迹(WB)实验检测对照组、10 μmol/L利血平组、50 μmol/L利血平组和EBSS组RA-VSMC自噬相关基因LC3和Beclin1的表达。 结果 MTT结果显示，与对照组比较，5 μmol/L利血平组、10 μmol/L利血平组、20 μmol/L利血平组和50 μmol/L利血平组细胞活力均显著降低(P < 0.05或P < 0.01);mRFP-GFP-LC3双荧光体系结果显示，对照组和10 μmol/L利血平组细胞中无明显自噬小体，50 μmol/L利血平组和EBSS组细胞形成明显自噬小体;qPCR结果显示，与对照组比较，10 μmol/L利血平组LC3 mRNA表达水平差异无统计学意义(P > 0.05)，50 μmol/L利血平组和EBSS组LC3 mRNA表达水平显著升高(P < 0.05或P < 0.01);10 μmol/L利血平组、50 μmol/L利血平组和EBSS组Beclin1 mRNA表达水平显著升高(P < 0.01);WB结果显示，与对照组比较，10 μmol/L利血平组、50 μmol/L利血平组和EBSS组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率显著升高(P < 0.01)，10 μmol/L利血平组、50 μmol/L利血平组和EBSS组Beclin1蛋白表达水平显著升高(P < 0.01) ......