朱激扬 陈华 徐燕芳

    [摘要] 目的 研究小檗胺联合拉帕替尼对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响。 方法 MTT法检测不同浓度的小檗胺和拉帕替尼单独用药及联合用药对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖抑制作用;采用CompuSyn软件分析不同剂量组联合用药的联合指数CI，确定最佳联合方案;将细胞随机分为4组：空白对照组、小檗胺组、拉帕替尼组以及联合用药组，用筛选出的最佳联合剂量分别进行药物干預，流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。 结果 相对于单独用药，小檗胺和拉帕替尼联合用药能够更加显著地抑制MDA-MB-231细胞增殖，差异有统计学意义(P 98.0%)，用DMSO配制成50 mmol/L储存备用;拉帕替尼(GSK，批号：J20180012);DMEM、胎牛血清(Gibco公司，批号：13100056、1725107);MTT试剂盒(碧云天，批号：C0010);Annexin V/PI细胞凋亡检测试剂盒(Thermo公司，批号：BMS500F1-201);超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司，SW-CJ-2FD);流式细胞仪(Calibur DB，USA)。

    1.3 实验方法

    1.3.1 细胞培养 ?MDA-MB-231细胞株培养于含10%的胎牛血清、青霉素200 U/mL、链霉素200 U/mL的完全培养液DMEM中，置于37℃、5%CO2培养箱中培养。每2天换液1次，待80%～90%融合后，以0.25%胰蛋白酶消化，按1∶3传代，置37℃、5%CO2培养箱内继续培养用于后续实验。

    1.3.2 MTT法检测小檗胺与拉帕替尼单独及联合用药对MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用 ?取对数期生长的MDA-MB-231细胞 ......