程虹 李颖霞 王小琴

    [摘要] 目的 探討慢性肾脏病(CKD)3～5期患者α-Klotho、成纤维细胞生长因子23(FGF23)和钙磷水平的变化情况及CKD病情与α-Klotho、FGF23和钙磷代谢水平的相关性。 方法 选择2018年6—12月在湖北省中医院肾病科就诊的CKD 3～5期患者20例作为CKD组，另选择22名健康人作为正常组。检测两组血清中α-Klotho、FGF23、甲状旁腺激素(PTH)、估算肾小球滤过率(eGFR)和钙、磷水平变化。 结果 CKD组血清磷、PTH及FGF23水平高于正常组，钙及α-Klotho、eGFR水平低于正常组，差异有统计学意义(P 0.05)，具有可比性。本研究经我院医学伦理审查委员会审查通过并批准(批件号：2011[363])，所有患者及家属均签署知情同意书。

    1.2 方法

    相关生化指标检测：所有患者均空腹抽静脉血5 mL，室温下静置30 min后，3000 r/min离心5 min，吸取上层血清并置于-80℃冰箱中保存备用，采用全自动生化检测仪(贝克库尔曼特AU5800)检测血清中钙、磷、甲状旁腺激素(PTH)及估算肾小球滤过率(eGFR)的含量。

    α-Klotho及FGF23水平检测：采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)对血清中α-Klotho及FGF23的含量进行测定。首先将α-Klotho和FGF23 ELISA试剂盒(Bio-Swamp，HM10697，HM10784)中的标准品按说明书稀释成1000.0、500.0、250.0、125.0、62.5 pg/mL，绘制标准曲线。然后进行加样、加酶，用封板膜封板后于37℃恒温箱中孵育30 min，然后进行洗涤，加入显色剂，终止反应后，将酶标板置于酶标仪中于450 nm波长下测定各孔的吸光度(OD值) ......