孙光源 郭圣超 武雪亮 薛军 屈明 郭飞 韩磊 韩洁

    [摘要] 目的 探讨UBQLN-1(泛素-1)和人Runt相关转录因子3(RUNX3)在直肠癌组织中的表达和临床意义。方法 选取2017年6月—2019年6月河北北方学院附属第一医院行手术切除的85例直肠癌组织和相应癌旁正常组织，应用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)和免疫组化法检测UBQLN-1及RUNX3 mRNA与蛋白水平，分析其与肿瘤临床病理特征间的关系及二者表达的相关性。 结果 直肠癌组织中UBQLN-1 mRNA表达水平高于癌旁正常组织，RUNX3 mRNA的表达水平低于癌旁正常组织，差异均有高度统计学(P 5 μg/L 11例;糖类抗原(CA)199≤37 U/mL 79例，CA199>37 U/mL 6例;cT分期T1～2、T3～4分别为32、53例;cN分期N-和N+分别为50、35例;临床病理分期[国际抗癌联盟UICC结直肠癌TNM分期系统(2018年第八版)[8]]cTNM分期：Ⅱ期50例，Ⅲ期35例;分化程度：低分化17例，中分化66例，高分化2例。本研究经我院医学伦理委员会批准，患者及家属知情同意。

    1.2 方法

    1.2.1 主要试剂? 反转录试剂盒购于中国大连TaKaRa公司(货号：639505);引物购于中国广州鼎国生物科技有限公司;RIPA试剂购于上海基星生物科技有限公司(货号：PP1901);鼠抗UBQLN-1(货号：ab128011)、RUNX3(货号：ab224641)单克隆抗体购于美国Abcam公司;免疫组化试剂盒(货号：GK600705)、DAB显色剂(货号：GK347010)购于上海Gene Tech公司。

    1.2.2 RT-PCR法检测直肠癌组织和癌旁正常组织UBQLN-1 mRNA和RUNX3 mRNA的表达? 取直肠癌组织和相应癌旁正常组织100 mg，彻底匀浆后按Trizol一步法提取总RNA，测定RNA浓度;设计UBQLN-1上游引物：5′-GGAGACGGTCATCCCTGTAGAT-3′ ......