任宇哲 于宙 陈宏 杨泽一 杨祥正

    [摘要] 目的 探討PCG治疗哮喘的作用靶点及分子作用机制。 方法 将80只Wistar大鼠随机分为Control组、Model组、平喘颗粒(PCG)组及地塞米松(DXMS)组，每组20只。联合吸入卵白蛋白和氢氧化铝制备哮喘模型大鼠，造模结束前5 d开始灌胃给予相应的药物干预治疗，每组根据成模情况取10只用于后续实验。比较四组支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清嗜酸性粒细胞(EOS)计数，EOS阳离子蛋白(ECP)和活化趋化因子(Eotaxin)的表达;采用RT-PCR和Western blot检测肺Notch、STAT信号通路相关蛋白及mRNA的表达。 结果 Model组BALF及血清EOS计数高于Control组(均P 90%，对照组腹腔注射相应体积的10% OVA溶液。

    1.3.2 分组及给药? 80只大鼠随机分为Control组、Model组、PCG组(5.4 g/kg)、DXMS组(1 mg/kg)，每组20只。在造模结束前5 d开始给药，PCG组和DXMS组给予相应药物，Control组和Model组给予等量的蒸馏水，激发时在激发前1 h给予相应药物，1次/d。同时，每天观察动物的基本体征。造模给药结束后，每组根据成模情况取10只用于后续实验。

    1.4 观察指标及检测方法

    1.4.1 实验动物取材? 实验结束后，从腹主动脉收集血液，并将其放入乙二胺四乙酸抗凝管中。分离颈部血管和神经，暴露气管，切1个小V形开口，并进行气管插管。将右肺结扎，5 mL预冷磷酸盐缓冲液(PBS)灌洗左支气管，收集支气管肺泡灌洗溶液(BALF)。取肺组织，右肺上叶用4%多聚甲醛固定。液氮迅速冷冻右肺下叶组织以备使用。

    组织匀浆：准确称取适量右肺下叶组织，加入9倍体积的缓冲溶液或氯化钠溶液于低温冷藏 ......