石喆 任珊 戴文斌

    [摘要] 目的 探讨乳腺良恶性病变中人乳头状瘤病毒(HPV)16/18型感染和Rb蛋白的表达状态及其相关性。方法 收集2016年1月—2017年12月广西壮族自治区柳州市人民医院乳腺外科乳腺手术切除标本为研究对象，其中浸润性导管癌(IDC)68例为IDC组、乳腺不典型导管上皮增生(ADH)30例为ADH组、乳腺纤维腺瘤旁正常乳腺组织30例为正常乳腺组。原位杂交法检测HPV16/18 DNA，免疫组织化学检测Rb蛋白的表达情况。 结果 IDC组中HPV16/18 DNA阳性率高于正常乳腺组和ADH组;Rb蛋白阳性表达率低于正常乳腺组和ADH组(均P 0.05)，具有可比性。

    1.2 方法

    所有标本为术中冰冻送检组织，经冰冻切片确诊后即选取组织常规固定，脱水，包埋。入选病例蜡块均做4 μm连续切片分别做苏木精-伊红染色、ISH和IHC检测。

    1.2.1 IHC染色? 采用EnVison两步法。即用型单克隆抗体Rb(MS-107-R7)购于Thermo公司，EnVison检测试剂盒(GK500710)购于基因科技(上海)有限公司。切片需做EDTA pH8.0抗原微波修复处理，操作步骤按说明进行。用已知乳腺癌Rb蛋白阳性切片作阳性对照，以磷酸盐缓冲液(PBS)取代一抗作阴性对照。

    1.2.2 ISH? 行地高辛标记ISH检测。HPV16/18 DNA探针和原位杂交试剂盒(ISH-5126)购于北京中杉金桥生物技术有限公司 ......