不同剂量藏红花提取液对大鼠慢性高眼压模型视神经及轴浆流的影响
轴突,1材料与方法,2藏红花提取液的配制,3实验动物,4慢性高眼压模型的建立及药物干预,5标本制备及观测,6统计学方法,2结果,1光镜下视神经的形态,2视神经超微结构,3逆行荧光金标记节细胞,3讨论
于敬妮 杨新光 杨尚飞 龚 珂 汪晓瑜西安市第四医院眼科,陕西西安 710004
青光眼是一组以视神经萎缩和视野缺损为共同特征的疾病,为全球第一位不可逆致盲眼病[1]。而青光眼性视神经损伤是其核心问题,也是最终病理结局,组织学改变为视网膜神经节细胞(retina ganglion cells,RGCs)凋亡、神经轴突、细胞损伤及轴浆流受阻等[2-3]。研究证明[4]青光眼性视神经损伤,筛板挤压,伴有视觉通路上外侧膝状体及初级视皮质的跨突触神经元变性,轴浆流受损,导致微循环改变、神经营养因子缺乏,视神经进一步损伤。有报道藏红花可以改善微循环和清除氧自由基,对缺血再灌注损伤模型有神经保护作用[5]。本课题组曾观察到藏红花提取液对兔高眼压造成的视网膜节细胞减少及视功能损伤具有保护作用,推测与其改善微循环、抗氧化等效应有关。为了进一步了解藏红花对慢性高眼压视神经损伤的作用,本研究经上丘荧光金逆行标记、视神经光镜及透射电镜等检查,观察了藏红花提取液对大鼠慢性高眼压模型视神经及其轴浆流的影响,为其临床应用提供理论基础。
1 材料与方法
1.1 材料
0.5 %盐酸丙美卡因滴眼液及妥布霉素地塞米松眼膏(16D04BA 15 mL 及OFTL1A 3.5 mg,美国爱尔康公司);藏红花由第四军医大学口腔医院药剂科提供。TonopenⅡ眼压计(美国MedtronicsALON 公司);光学显微镜(CX23 日本奥林巴斯株式会社);透射电子显微镜(H-9500 日本日立株式会社);荧光金染色剂(美国罗氏公司)。
1.2 藏红花提取液的配制
藏红花150 g,蒸馏水煮沸30 min 过滤2 次,浓缩,3 倍量950 mL/L 乙醇沉淀24 h,过滤,减压蒸馏,稀释成100 mL 装瓶,灭菌。用水稀释成50 g/L[6]。
1.3 实验动物
32 只SPF 级健康成年雄性SD 大鼠,9~10 周龄,体重250~300 g,由西安交通大学医学院实验动物中心提供,实验动物生产许可证号SCXK(陕)2016-0018,合格证号22-9601018,并通过西安交通大学医学院动物伦理委员会审查。排除眼部疾病,在避光、安静,22~24℃ ......
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