叶惠荣 袁惠玲 曹 茵 王西跃 吴丽华 陈桂林 陈丽娟 张玉娟

    广东省东莞市人民医院乳腺科，广东东莞 523000

    微RNA(miR)-221/222 定位于人染色体Xp11.3[1]，两者核心种子序列(68～72)完全同源，同时抑制miR-221/222 可抑制乳腺癌[2-3]、胶质瘤[4-5]等肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。研究显示[6]，耐药乳腺癌组织中miR-221/222 表达上调，但抑制miR-221/222 是否可增加三阴性乳腺癌(TNBC)的铂类药物敏感性目前较少见报道。鉴于此，本研究观察了抑制miR-221/222 对TNBC MDA-MB-231 细胞顺铂(DDP)敏感性的影响，现将结果报道如下：

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    细胞株：TNBC MDA-MB-231 细胞购自美国模式菌种收集中心(ATCC)细胞库，编号：TCHU202，第2 代细胞。

    试剂：miR-221 抑制剂、miR-222 抑制剂和miR-221/222 抑制剂(上海吉玛制药技术有限公司，货号：B05001)；MTT 检测试剂盒(美国Trevigen 公司，货号：4890-25-01)；Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡试剂盒(大连美仑生物技术有限公司，货号：MA0220)；Caspase-9、Bax、Bcl-2 一抗(美国Imgenex 公司，IMG-5709)。

    仪器：GENios 多功能酶标仪(瑞士TECAN 公司)；7900HT 实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)仪(美国ABI 公司)；E10001 电泳槽(美国Invitrogen 公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞分组和转染 取对数生长期的MDA-MB-231 细胞，将其随机分为对照组、miR-221 抑制组、miR-222 抑制组和miR-221/222 抑制组，分别转染空白试剂、miR-221 抑制剂、miR-222 抑制剂和miR-221/222 抑制剂，转染后均给予DDP 5 μg/mL 进行细胞培养[7]。

    1.2.2 荧光定量PCR 检测miR-221/222 mRNA 相对表达量 转染后24 h 时用Trizol 提取各组细胞的总RNA ......