刘 宏 易娅静 于 颖 代巧妹 张雨薇 杨 婧 张 博 仲丽丽

    1.黑龙江中医药大学基础医学院，黑龙江哈尔滨 150040；2.黑龙江中医药大学博士后流动站，黑龙江哈尔滨 150040；3.黑龙江中医药大学研究生学院，黑龙江哈尔滨 150040；4.黑龙江中医药大学中医药研究院，黑龙江哈尔滨 150040；5.黑龙江中医药大学第一附属医院，黑龙江哈尔滨 150040

    卒中后神经损伤是致残的主要原因[1]。脑卒中是一种具有两性差异的疾病，女性患脑卒中的风险比男性低。然而，这种保护作用在绝经后由于内源性雌激素的丢失而减弱。雌激素替代疗法在实验研究和临床试验中存在争议[2-4]。古方左归丸出自《景岳全书》，具有填精髓、补肾阴之效[5]。在临床被用于治疗肝肾阴虚型脑梗死恢复期、脑供血不足型眩晕、脑卒中后遗症患者呈反复头晕、头痛伴手足麻木、腰酸耳鸣、记忆力减退等属肾精亏损、髓海空虚诸症[6-7]。中医学认为，“肾主生殖”[8]，肾的部分功能相当于现代医学“下丘脑-垂体-性腺轴”[9]的功能。有实验显示[10]左归丸可明显提高去卵巢大鼠海马ERβ 表达，改善其惊恐反应，并可通过上调海马组织及齿状回神经生长因子(NGF)水平来延缓大鼠衰老[11]。本课题组前期实验证实，左归丸还可以通过上调脑源性神经营养因子(BDNF)水平改善受惊吓大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠的缺血再灌注损伤[12]。然而，左归丸预处理是否通过雌激素受体介导的BDNF 和NGF 信号通路改善脑缺血再灌注损伤仍不清楚。本研究探讨左归丸是否通过调节雌激素受体(estrogen receptor，ER)信号通路发挥神经保护作用。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    雌性SD 大鼠，SPF 级，8～10 周龄，170～230 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。大鼠置于笼内[温度(22±1)℃，湿度45%～55%]，12 h 灯/12 h 暗循环，允许随意获取食物和水。所有实验方案均符合黑龙江中医药大学医学伦理委员会批准的《实验动物饲养与使用规范》。

    1.2 主要药物和试剂

    左归丸(北京同仁堂药店，批号：070503)；17β-雌二醇(Beyotime，货号：MB1098)；ICI182780(medchemexpress，货号：HY-13636)；anti-ERα(Proteintech Group ......