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编号:510074
RNAⅢ抑制肽对不同生长时相金黄色葡萄球菌毒力因子表达的影响
http://www.100md.com 2021年1月21日 中国医药导报 2020年第36期
生物膜,对数,1材料与方法,1仪器和试剂,2菌株和药品,3细菌培养,4细菌生物膜,5qRT-PCR,6统计学方法,2结果,1RIP1183对MRSA(USA300)生长曲线的影响,2RIP1183对
     周 颖 侯 征 薛小燕 魏 明 李 汾 姚 佳 张 晔 汪 洋

    1.西安医学院药理学教研室,陕西西安 710021;2.空军军医大学药理学教研室,陕西西安 710032;3.西安医学院分子病毒与病毒免疫学实验室,陕西西安 710021

    耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的群体感应系统-附属基因调节(agr)系统,调控多种毒力因子表达[1-3],其中最重要的一类毒力因子是葡萄球菌溶素[4-6]。MRSA 还能够表达一些黏附蛋白,促进细菌生物膜的形成。这些毒力因子在MRSA 侵袭性感染过程中发挥重要作用[7-8]。RNAⅢ抑制肽(RIP)是agr 系统抑制剂。本研究设计合成了新的RIP 衍生物RIP1183,检测其对MRSA 的生长和生物膜形成的影响,以及在不同时相对重要毒力因子表达的影响,探讨RIP1183 抗菌、抗生物膜的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 仪器和试剂

    ELx800 酶标仪(美国Bio-tek 公司);AL204 电子天平(梅特勒-托利多);ZHWY-200D 恒温培养振荡器(上海智诚分析仪器制造有限公司);MX3005P1 实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)仪(美国安捷伦)。微量RNA 提取试剂盒RNeasy Mini Kit(QIAGEN),细菌RNA 提取试剂盒RNAprep pure Bacteria Kit,反转录试剂盒PrimeScript Kit,Premix Taq RT-PCR 系统(TaKaRa)。异硫氰酸荧光素(FITC)、葡萄糖均购自Sigma 公司;胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)培养基购自北京陆桥技术有限责任公司。

    1.2 菌株和药品

    MRSA(USA300)由美国国立卫生研究院(NIH)的Michael Otto 教授友情惠赠。RIP1183 由本课题组设计,委托空军军医大学生物制药教研室合成 ......

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