芍药苷对血管内皮生长因子诱导的人脐静脉内皮细胞小管形成的影响
划痕,培养液,1材料与方法,1药品,试剂与仪器,2实验样本,3HUVECs的分离与培养,4噻唑兰(MTT)法测定PF对HUVECs活力的影响,5MTT法测定PF对VEGF所致HUVECs细胞活力的影
迟骁玮 陈刚领1.国家卫生健康委医药卫生科技发展研究中心,北京 100044;2.中国药科大学中药学院,江苏南京 211198
血管生成是指从已存在的微血管床上芽生出新的血管系统的过程,主要包括蛋白酶的产生、内皮细胞的迁移和增殖、内皮细胞管道化分支形成血管环和形成新的基底膜等过程[1-2]。血管生成与肿瘤的发展过程关系密切,实体瘤可通过调节肿瘤微环境促使新的毛细血管生成,进而在瘤体内形成微循环网,以实现肿瘤的血液及营养物质供应[3-4]。研究证实,在瘤体内未形成新生血管前,肿瘤细胞通过组织弥散的方式获得氧和营养物质,如果没有血管系统,实体瘤的增长不会超过1 cm3[5-7]。因此,通过抑制血管生成的方式阻断瘤体的给养通道,限制瘤体的氧和营养物质供应,可以有效控制瘤体的增大,是治疗肿瘤的有效方式之一。肿瘤血管生成是一个多环节的过程,在促进新生血管形成中,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是重要的诱导因子之一,且其在体外有促进内皮细胞小管形成的作用[8-9]。芍药苷(paeoniflorin,PF)是一种单萜糖苷类化合物,在毛茛科植物芍药的根中含量较高,具有抑制血小板、抗血栓、减轻脑缺血再灌注损伤及抗肿瘤等药理活性[10-12]。本研究拟针对PF 抗血管生成作用展开研究,旨在通过相关研究评定PF 抑制血管生成的作用及相关效果并初步探讨相关机制。
1 材料与方法
1.1 药品、试剂与仪器
PF:纯度>98%,购自南京替斯艾么中药研究所。M199 培养液:批号为0225,购自Invitrogen 公司。胰蛋白酶:批号为6C157D25,购自南京生兴生物技术有限公司。VEGF:批号为1207CY08-1,购自PeproTech公司。低温离心机(型号:1-15K,Sigma Corporation);酶标仪(型号:1500,Mullikan Spectrum);超净台(型号:SW-CJ-IF ......
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