赵亚如 刘 洋 吕 洋 王文华 王浩宇 王巧敏 王海萍

    河北北方学院组织学与胚胎学教研室，河北张家口 075000

    随着饮食结构的改变，缺血性心脏病(ischemic heart disease，IHD)患病率逐渐升高，临床一般采用药物、介入或者搭桥等传统治疗，但这些方法只是缓解症状，心肌细胞(cardiac myocytes，CMs)如果在心肌缺血区域内坏死，会形成纤维性瘢痕组织，从而发展为心力衰竭。通过临床前研究表明，随着骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMMSC)移植，梗死面积总体减少了约7%，心功能改善了约11%[1]。研究发现，通过加入化合物或者细胞因子、基因修饰、微环境的调节和物理因素刺激等都可以促进BMMSC 向CMs 分化[2-4]。丁酸钠通过抑制组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase，HDAC)，使转录激活，从而促使BMMSC 向CMs 分化[5]，但低浓度的丁酸钠抑制细胞增殖[6]，这限制丁酸钠诱导分化的能力。成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2，FGF-2)可以通过ERK 和JNK 途径协同调节细胞增殖再生[7-8]；丁酸钠可以抑制HDAC 促进FGF-2 生成[9-10]，因此为了提高其分化的效率，本研究选择FGF-2 与丁酸钠联合诱导BMMSC 向CMs 分化。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物、试剂

    SPF 级2～3 周龄SD 大鼠(25±10)g 购自北京斯贝福生物技术有限公司[许可证号：SCXK(京)2016-0002，合格证号：No.1103241911030990]，实验过程遵循3R 原则。

    流式细胞仪和鼠抗缝隙连接蛋白43(connexin 43，CX43)抗体(货号：610061)购自美国BD 公司；免疫细胞化学染色试剂盒(货号：SP-9000)购自北京中杉金桥生物技术有限公司；心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I，cTnI)抗体(货号：GTX109331)购自美国Gene Tex 公司；兔抗Desmin 抗体(货号：ET1606-30)购自河北华安生物药业有限公司 ......