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编号:508469
miR-145 对三阴性乳腺癌细胞增殖、侵袭及转移能力的影响
http://www.100md.com 2021年12月26日 中国医药导报 2021年第32期
靶向,组间,调控,1材料与方法,2细胞培养及分组,3实时聚合酶链反应检测各组miR-145和ADAM17,EGFRmRNA的表达,4Westernblot检测各组ADAM17及EGFR蛋白的表达,5
     朱凌霄 张 兰 张雪鹏 李昊鑫

    华北理工大学附属医院肿瘤外科,河北唐山 063000

    三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)是乳腺癌中一种难治性亚型,由于缺乏特异性受体,目前TNBC 主要采用传统的化疗和手术治疗,但预后较差,所以寻找新的治疗手段,尤其是靶向治疗是目前的研究热点[1-2]。微RNA(microRNA,miRNA)是强大的“基因调节剂”,其中miR-145 作为表达较为显著的一类抑癌基因,可抑制TNBC 的增殖、转移及侵袭[3-4]。本课题组前期发现,miR-145 通过调控解聚素-金属蛋白酶17(adisintegrin and metalloproteinase 17,ADAM17)可影响MCF-7 乳腺癌细胞的增殖和侵袭[5]。为进一步观察其在TNBC 中的作用,本研究在降低TNBC 细胞中miR-145 的表达水平后,通过测定和分析下游ADAM17 及与其密切相关的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)相关指标的变化后,观察其对TNBC 细胞增殖和侵袭的影响,并探讨其作用机制,为TNBC 的靶向治疗提供新思路。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    人TNBC MDA-MB-231 细胞株(CL-0150)购于武汉普诺赛生命科技有限公司;miR-145 无义序列(miR2N0000001-1-1)、miR-145 inhibitors(miR20000)以及引物(miR01101)均由广州锐博生物科技有限公司设计与合成;Leibovitz L-15 培养基(10-045-CVR)购于美国Corning 公司;胎牛血清(A0100-3210)购于德国Cegrogen 公司;实时聚合酶链反应试剂盒(RK21 203)购于武汉爱博泰克生物科技有限公司;Lipofec tamine 2000 试剂(11668027)购于美国Invitrogen 公司;ADAM17(GTX101358)购于美国GeneTex 公司;EGFR抗体(ARG66204)购于上海Arigo 公司 ......

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