双歧杆菌通过IL-6介导EMT对HCT116结肠癌细胞侵袭转移影响
小室,货号,划痕,1材料与方法,1主要材料与仪器,2细胞培养,3细胞分组,4Westernblot检测,5免疫荧光技术检测IL-6,上皮钙黏素和神经钙黏素的表达及定位,6细胞划痕试验和Tran
杜 恒 吴安定 张红英 余 洁 简 辉湖北省黄冈市中心医院胃肠外科,湖北黄冈 438000
研究表明,肿瘤炎症微环境可分泌炎症因子诱导上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)发生,促进其发生侵袭转移[1-2]。白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)是肿瘤相关巨噬细胞重要的炎症、免疫调节介质,与肿瘤细胞生长、凋亡、增殖密切相关[3-4]。已有研究表明IL-6 可诱导胃癌、肝癌EMT 的发生[5-7]。双歧杆菌体通过黏附和定植于肠道黏膜上皮细胞,发挥抗肿瘤、抑菌、抗氧化、抗感染、免疫应答等多种作用[8],但其对结肠癌细胞炎症环境及EMT 的影响仍不是十分清楚。本研究通过将双歧杆菌与HCT116 结肠癌细胞在体外进行共培养,探讨双歧杆菌对HCT116结肠癌细胞炎症微环境及EMT 的影响,为结肠癌复发转移的治疗提供一定的理论参考。
1 材料与方法
1.1 主要材料与仪器
结肠癌细胞株HCT116(iCell 公司,货号:iCellh071);双歧杆菌(北京北纳创联生物技术研究院,货号:BNCC180715);IL-6 抗体(Abcam 公司,货号:ab23 3706);上皮钙黏素抗体(Abcam 公司,货号:ab40772);神经钙黏素抗体(Abcam 公司,货号:ab18203);GAPDH抗体(Abcam 公司,货号:ab37168);Cy3 标记山羊抗兔(Aspen 公司,货号:AS-1109);BCA 蛋白质浓度测定试剂盒(Aspen 公司 ......
您现在查看是摘要页,全文长 6240 字符。