赵玉玲 黄 沂 周艳琼 蒋菲菲 陈海燕

    广西中医药大学第一附属医院护理部，广西南宁 530023

    神经根型颈椎病(cervical spondylotic radiculopathy，CSR)是临床上最常见的颈椎病，神经病理性疼痛系其主要症状。神经根受压导致的神经根损伤是CSR患者疼痛的主要原因[1]，神经根损伤导致神经细胞凋亡增多。如何降低细胞凋亡，修复神经根损伤是治疗CSR 关键。细胞自噬与神经病理性疼痛显著相关，调节细胞自噬可改善疼痛[2]。PI3K/Akt/mTOR 通路在细胞增殖与凋亡中起关键作用，是经典的抗凋亡通路，Akt/mTOR 通路是细胞自噬重要的负性调控路径[3]，激活该通路能减少细胞凋亡，促进受损神经恢复，发挥对细胞的保护作用。前期实验证实药熨疗法可降低CSR 大鼠自发性疼痛评分，提高机械痛阈值[4]，本研究基于Akt/mTOR 通路探讨药熨疗法调节细胞自噬、减少细胞凋亡的机制，为药熨疗法的临床应用提供理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组

    选取体重150～200 g 的4 周龄SPF 级SD 大鼠18 只(斯贝福生物技术有限公司)，许可证号：SCXK(京)2019-0010，予温度(23±2)℃、湿度60%、12 h 循环灯光、标准饲料、自由饮水，饲养7 d 适应环境，稳定机能。随机选取其中6 只作为空白组，其余建立CSR 模型。造模成功后，将其按随机数字表法分为模型组、药熨组，每组各6 只。对大鼠处置遵从实验动物福利相关规定进行。

    1.2 试剂与仪器

    1.2.1 主要试剂 RIPA 裂解液(北京索来宝公司，货号：R0020)；ECL 发光试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司，货号：sc-2048)；PVDF 膜(Millipore 公司，货号：IPVH00010)；山羊抗兔二抗、山羊抗鼠二抗(北京中杉金桥生物技术有限公司，货号：ZB2301、ZB2305)；p-Akt、p-mTOR、Beclin-1、LC3A/B 抗体、β-actin(Affinity公司 ......