内质网应激通路在棕榈酸诱导的人牙周膜干细胞凋亡中的作用
牙周病,高浓度,1材料与方法,1细胞株,2主要试剂与仪器,3实验分组,4MTT法检测hPDLSCs增殖率,5AnnexinVFITC-PI观察hPDLSCs凋亡情况,6Westernblot法检测蛋白表达
刘 涛 李 晶 鲍翠玉1.湖北科技学院附属第二医院口腔科,湖北咸宁 437100;2.湖北科技学院糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室,湖北咸宁 437100
牙周病是一种由多种因素引起成年人牙齿脱落的炎症性疾病[1]。据报道[2-3],糖尿病促进了牙周病的发生和严重的牙槽骨丢失[4],血糖、血脂过高导致牙周附着丧失[5],而且脂毒性对机体的危害远远高于糖毒性[6]。人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)是牙周组织中一种自我更新多向分化的间充质干细胞[7-8],已证实其凋亡是牙周器质性病变的重要因素[9]。近年研究发现牙周病的防治与内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)途径的激活有关[10]。棕榈酸(palmitic acid,PA)通过ERS 诱导细胞凋亡引发多种疾病[11],也可诱导hPDLSCs 凋亡和抑制其成骨分化[12],但是ERS 对PA 诱导的hPDLSCs 凋亡的作用机制目前尚未明确。本研究通过观察PA 对hPDLSCs的存活率、细胞凋亡荧光变化、ERS 凋亡相关蛋白的表达,探讨PA 是否通过ERS 凋亡通路促进hPDLSCs凋亡。以期为糖尿病性牙周病的防治提供新思路。
1 材料与方法
1.1 细胞株
hPDLSCs(上海莼试生物技术公司)。
1.2 主要试剂与仪器
DMEM 培养基(Hyclone,SH30021.01);胎牛血清(Gibco,26140-079);PA(Sigma,P5585);4-PBA(Sigma,P21005-25G);Annexin VFITC-PI 试剂盒(贝博,BB4101-50T);MTT 粉末(众一生物科技 ......
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