熊成浩 杨波 唐道琪 薛琦 方海洲 王菊芳

    1.珠海亿胜生物制药有限公司，广东珠海 519085；2.亿胜生物科技有限公司，香港 999077；3.华南理工大学生物科学与工程学院，广东广州 510006

    [关键字] 碱性成纤维细胞生长因子；软骨损伤；细胞凋亡；肿瘤坏死因子-α

    骨关节炎(osteoarthritis，OA)是一种严重影响老年人健康关节性疾病[1-2]，炎症及炎症引起的关节软骨损伤与骨关节炎的发生发展有着密切的联系[3-4]。近来的研究发现碱性成纤维细胞因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)在软骨、神经及心肌修复等过程中扮演重要的角色[5-7]。尽管已有研究报道，bFGF 可以通过促进软骨细胞的生长，分化及胞外基质的合成修复损伤的软骨组织[8]，但是bFGF 对炎症条件诱导的软骨细胞损伤是否具有保护作用目前并不明确，本研究旨在利用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和放线菌酮(cycloheximide，CHX)联合诱导的体外软骨细胞炎症损伤模型，探究bFGF 对于软骨细胞在炎症环境下的保护作用及机制，为bFGF 在软骨损伤修复领域的应用提供了实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 细胞培养

    膝关节来源的人原代软骨细胞(4650)购自美国ScienCell 公司，采用人软骨细胞培养基(4651，Scien-Cell 公司)进行培养，本实验中所用细胞均使用P3 代细胞。

    1.2 主要试剂和仪器

    bFGF(珠海亿胜，批号：200505)；TNF-α(南京金斯瑞生物科技股份有限公司，Z01001)，凋亡试剂盒(BD，556547)，JC-1 试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司，C2006)；MTT(Sigma，M5655)；放线菌酮(上海翊圣生物科技有限公司，40325ES03)；兔抗鼠Bcl-2和Bax 抗体(CST ......