姜佳宁 王 琪 王若雨 高金琦 陈雯婷 王 刚

    大连大学附属中山医院肿瘤科，辽宁大连 116001

    恶性肿瘤的发病率、死亡率逐年呈稳定上涨趋势，发病年龄则出现年轻化趋势[1]。随着肿瘤发病机制探讨、新药研发、诊疗手段的不断规范化、精准化，患者的诊断率、治疗有效率都有了明显的提升。然而，恶性肿瘤细胞通常具备高侵袭能力，一旦出现肿瘤转移，将大大提高患者的死亡风险[2]。虽现有技术已明显提高了肿瘤患者的检出率，但对于精准诊疗、评估预后、评价疗效等方面存在很多不足之处，仍有很大一部分患者就诊时已处于晚期，失去最佳治疗机会。提高恶性肿瘤患者的早期检出率是解决问题的关键。随着循环肿瘤细胞(circulating tumor cells，CTC)的出现及不断深入研究，CTC 分选作为一种“液态病理活检”技术，可协助临床诊断明确、转移评估、预后判断、疗效评价及精准个体化医疗的指导[3-4]。美国强生公司开发的CellSearch System 是唯一被食品药品监督管理局批准，用于临床乳腺癌、肺腺癌、结直肠癌、前列腺癌患者的CTC检测。但该装置因检测成本高、操作复杂、体积笨重等不足，尚未广泛应用于临床患者CTC检测。因此，如何实现临床CTC 快速、方便、准确的检测一直是研究的热点。微流控芯片技术具备微型化、自动化、集成化和便携化等优势，弥补传统检测方法的不足，在生物技术、医学、物理研究等方面均有所应用[5]。因此，利用微流控芯片的优势，构建集成化的CTC 分选装置，克服了CellSearch System的不足，具备成本低、无创、简单、可重复、顺应性好等优势，并可获得高达90%以上的检测率，更适合于临床患者CTC的检测[6]。本研究将应用该检测装置对55 例临床肿瘤患者外周血标本CTC 分选，分析CTC 分选结果与患者临床病理特征，包括发病年龄、性别、肿瘤分化程度、分期、类别、肿瘤转移及疗效评价的相关性。以期进一步实现该装置的临床普及应用，为提高肿瘤患者的诊断及治疗提供更好的方法。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 仪器 倒置荧光显微镜、光刻机、甩胶机、等离子去胶机、超净工作台、二氧化碳水套式培养箱、LS100CO2 激光雕刻机、OB1 pressure controller、热压机、低温高速离心机 ......