修忠标 刘 洪 张良志 刘 晶 林巧璇 卢莉铭 郭泽兴 杨金硕

    1.福建中医药大学附属人民医院骨伤一科，福建福州 350004；2.福建中医药大学附属第三人民医院骨伤科，福建福州 350122；3.福建中医药大学中医学院，福建福州 350122；4.福建中医药大学附属康复医院骨伤科，福建福州 350003

    中医原创微创技术针刀疗法治疗膝骨关节炎(knee osteoarthritis，KOA)效果明确，已被多个KOA临床诊疗指南推荐[1-2]，然而其具体作用机制尚不明确。既往研究表明，筋骨失衡引起的异常机械应力可通过调控软骨细胞自噬和凋亡水平参与KOA 软骨退变[3-4]。而针刀可恢复膝周骨骼肌、韧带功能，调整膝关节力学结构，调节筋骨平衡，延缓软骨病理改变[5-7]。针刀治疗KOA 软骨保护作用可能与调节软骨细胞自噬和凋亡水平相关，团队前期已从软骨组织学层面证实，针刀可减少KOA 兔细胞凋亡，改善软骨病理形态[8-9]，本研究将进一步从原代软骨细胞活性、凋亡和自噬等层面来探讨针刀改善KOA 退变的治疗机制。

    1 对象与方法

    1.1 实验动物

    普通健康雄性6 月龄新西兰大白兔24 只，体重(2.5±0.5)kg，购于上海松联实验动物责任有限公司[生产许可证号码：SCXK(沪)2017-0008]，由福建中医药大学实验动物中心[合格证号：SYXK(闽)2019-0007]代购并饲养。单笼喂养，自然光照，自由进食、饮水，室温(23±2)℃。本研究通过福建中医药大学实验动物伦理委员会批准(批件号：FJTCMIACUC)，整个实验过程中对动物的各种处理均遵照科技部颁布的《关于善待实验动物的指导意见》有关动物的使用及伦理学规定。

    1.2 实验试剂与主要仪器

    戊巴比妥钠(上海上药新亚有限公司，生产批号：811B025)；胰蛋白酶(德国Biofroxx 1004GR100)、DMEM 高糖培养基(美国HyClone D6429)；胎牛血清(澳大利亚Gibco 10099)；4%多聚甲醛(北京索莱宝科技有限公司 ......