向文远 邓迎杰 廖 军 方 锐

    1.新疆医科大学第四临床医学院，新疆乌鲁木齐 830000；2.新疆医科大学附属中医医院骨科，新疆乌鲁木齐 830000

    骨性关节炎(osteoarthritis，OA)是老年人致残的主要原因[1-2]。因此寻找OA 的有效治疗手段是骨科学领域研究的重点内容。以往已有研究[3-4]证实髓间充质干细胞(bone marrow mesenchyml stem cells，BMSCs)能通过多途径对骨组织损伤起到修复作用[5]，但是其成骨能力较弱，而IGF1 基因是一种能诱导BMSCs 向成软骨细胞和成骨细胞分化、成熟的关键转录因子，在骨修复与重建中发挥重要作用[6]。本研究将通过构建IGF1 基因慢病毒载体，并将其转染BMSCs 后对大鼠OA 模型进行治疗，以期为OA 的临床治疗奠定实验基础。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF 级Wistar 大鼠40 只，10～12 周龄，体重280～320 g，雄性，购自新疆医科大学实验动物中心，生产许可证号：SCXK(新)2018-0002，使用许可证号：SYXK(新)2018-0003，饲养条件：恒温20～25℃、恒湿(50±5)%。实验经新疆医科大学附属中医医院伦理委员会批准(2019102283)。

    1.2 主要试剂及仪器

    Lenti-IGF 1-EGFP 慢病毒(上海吉凯基因化学技术有限公司，批号：H40582)；Ⅰ型胶原C 端肽(C-terminal peptide of type Ⅰcollagen，CTX-Ⅰ)试剂盒(elabscience，批号：E-EL-R1456c)；CTX-Ⅱ试剂盒(elab science，批号：E-EL-R2554c)；白介素(interleukin，IL)-1α 试剂盒(elabscience，批号：E-EL-R0011c)；IL-6 试剂盒(elabscience，批号：E-EL-R0015c)；Trizol(Aidlab，批 号：Lot：252250AX)；HiScript Reverse Transcriptase(RNase H)(VAZYME，批号：R101-01/02)；SYBR Green Master Mix(RNase H)(VAZYME，批号：Q111-02)；SYBR Green Master Mix(RNase H)(VAZYME，批号：ET105-01)；兔多抗GAPDH(杭州贤至生物有限公司，批号：AB-P-R 001)；鼠单抗糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β ......