艾灸足三里、太溪对肾虚-黄体抑制流产模型孕鼠蜕膜组织细胞凋亡及相关蛋白表达的影响
孕酮,1材料与方法,1实验动物,2主要仪器及试剂,3实验方法,4观察指标及检测方法,5统计学方法,2结果,1各组大鼠一般情况,2各组大鼠子宫直径及宫内胚胎数比较,3各组大鼠蜕膜组
胡 珊 陈鹏典 宁 艳 马 飞 刘昱磊 邱婷婷 覃晓玲 唐 梦南方医科大学附属深圳妇幼保健院中医科,广东深圳 518028
自然流产是目前全球生殖医学领域研究的热点难点,发生在妊娠12 周内称为早期自然流产。近年研究[1-2]表明,细胞凋亡是调控细胞增殖、保证胎盘组织结构和功能的重要调控机制,妊娠过程中胎盘绒毛和蜕膜的细胞凋亡与增殖处于一种相对平衡的状态,当这种平衡被打破可能影响妊娠结局。现代研究[3]发现,中医药可通过调节生殖内分泌功能和免疫因子功能、协调母胎界面滋养细胞增殖凋亡及改善胎盘微循环障碍等环节干预自然流产。本课题组前期临床研究[4-5]发现,“补肾健脾”中药可一定程度改善早期妊娠先兆流产患者焦虑情绪状态及免疫和凝血功能,提高保胎疗效。在此基础上,观察“补肾健脾”灸法对肾虚-黄体抑制流产模型孕鼠蜕膜组织相关凋亡细胞蛋白表达的影响,以探讨艾灸防治早期流产的可能作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物
选购广东省实验动物中心SD 大鼠雄性16 只、雌性36 只,周龄8~10 周,体重220~250 g,许可证号为SCXK(粤)2018-0002,实验动物使用许可证号为SYXK(粤)2020-0230。购入后于SPF 实验动物中心空调下架式单笼喂养,环境温度20~25℃,湿度50%~60%,光照、黑暗各12 h 交替,标准颗粒饲料、灭菌注射用水喂养。本实验已通过深圳拓普生物科技有限公司动物实验福利和伦理审查(TOP-IACUC-2020-07-0011)。
1.2 主要仪器及试剂
1.2.1 主要仪器 超净工作台(型号:YJ-VS-1,无锡一净净化设备有限公司);倒置显微镜(型号:Mshot MF53,广州明美光电有限公司);生物组织包埋机(型号:EG11504,德国Leica 公司);组织脱水机(型号:ASP3 00S,德国Leica 公司);冷却台(型号:EG1150C,德国Leica 公司);石蜡切片机(型号:RM2235,德国Leica公司)等。
1.2.2 试剂 地屈孕酮片(360397,10 mg/片,荷兰Abbott公司);米非司酮片(200402,25 mg/片,广州朗圣药业有限公司);羟基脲片(0B0193D05 ......
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