刘梦真 孙蓉蓉 刘艳华 张有为

    1.徐州医科大学临床学院，江苏徐州 221009；2.江苏省徐州市中心医院肿瘤内科，江苏徐州 221009

    恶性肿瘤已成为我国居民的主要死因，探索肿瘤发生发展中的关键基因具有重要意义[1]。FAM83H 位于染色体8q24.3，是FAM83 家族成员之一，最初因其在牙齿发育中的重要作用被关注，FAM83H 在肝细胞癌、肾癌、胃癌、胰腺癌和宫颈癌等肿瘤中高表达，并促进癌细胞的生长、侵袭和转移[2-6]。FAM83H-AS1 位于FAM83H 的对侧，是其天然反义转录本，二者以头对头(5’-5’)形式互补重叠。研究表明，FAM83H-AS1 是多种肿瘤潜在的诊断、预后标志物和治疗靶点[7-9]。本研究拟在泛癌种水平研究FAM83H 和FAM83H-AS1 在肿瘤发生发展中的生物学作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    CCK-8 购于Signalway Antibody(CP002)；Transwell小室购于Costar(3422)；Trizol 购于美国Invitrogen 公司(1596026)；逆转录试剂盒购于Fermentas(#K1622)；SYBR Green PCR 试剂盒(#K0223)、BCA 蛋白定量试剂盒(PICPI23223)、兔抗人FAM83H 多克隆抗体(PA5-55094)购于Thermo；兔抗人GAPDH 单克隆抗体(#5174)购于CST；羊抗兔HRP 标记二抗(A0208)、Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒(C1036)购于上海碧云天生物技术有限公司。

    1.2 生物信息学分析

    在线分析FAM83H 基因在恶性肿瘤中的表达及预后，测试数据集来自基因表达谱动态分析(gene expression profiling interactive analysis，GEPIA)工具(http：//gepia2.cancer-pku.cn)[10]。

    1.3 细胞培养和转染

    siFAM83H 与siFAM83H-AS1 干涉载体由上海基尔顿生物公司构建 ......