前列腺六段跨膜上皮抗原4 对炎症环境下前列腺癌细胞增殖的影响
诱导,1材料与方法,1细胞培养与处理,2细胞转染,3蛋白免疫印迹,4采用酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)检测细胞因子的含量,5CCK-8法
孙兴华 于 涛 张学新 常鸿艳 洪月光 李伟伟1.河北省秦皇岛市中医医院肿瘤科,河北秦皇岛 066000;2.潍坊医学院生命科学与技术学院,山东潍坊 261053;3.河北省秦皇岛市中医医院心血管内科,河北秦皇岛 066000;4.河北省秦皇岛市妇幼保健院生殖医学科,河北秦皇岛 066000
前列腺癌是危害全世界男性健康的最常见恶性肿瘤之一[1]。炎症在多种人类肿瘤包括前列腺癌的发生、促进和发展中起重要的作用[2]。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是革兰氏阴性菌外膜的主要成分,LPS的识别与跨膜信号转导,是引起细胞炎症效应的关键。有研究显示,长期慢性炎症反应的发生是非小细胞肺癌、胃癌和宫颈癌发生的重要致病因素[3-6]。感染及炎症与前列腺癌的关系密不可分,革兰氏阴性杆菌的反复感染是慢性前列腺炎发病的重要原因,增加了PCa细胞的增殖能力、迁移能力及局部侵袭能力[7-8]。前列腺六段跨膜上皮抗原(six-segment transmembrane epithelial antigen of prostate,STEAP)家族参与多种生物学过程,包括增殖和炎症,在癌症治疗中发挥潜在作用[9]。STEAP4 是STEAP 家族成员之一,参与乳腺癌和膀胱癌的发展,并与结肠癌的炎症有关[10-12]。另有研究表明,STEAP4 在前列腺癌组织中高度表达,并且相关性分析得出STEAP4 高表达的患者比低表达的患者其前列腺癌复发的时间更快,可作为前列腺癌患者的预后指标[13]。然而,STEAP4 在前列腺癌发展中的作用和相关机制仍不清楚。本研究旨在探讨STEAP4 对LPS 诱导的前列腺癌细胞增殖的影响,可能为前列腺癌的治疗提供新思路。
1 材料与方法
1.1 细胞培养与处理
人前列腺癌细胞系PC3(货号:CRL-1435)和VCaP(货号:CRL-2876)由ATCC 提供,并在含有10%胎牛血清(Gibco,美国)和1%青霉素/ 链霉素的DMEM(赛默飞世尔科技公司,中国)中于37℃、5%CO2条件下培养。参照Xu 等[14]研究,将PC3 和VCaP细胞暴露于1 μg/ml 的LPS(索莱宝,北京)中孵育24 h诱导炎症环境 ......
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