毛柳英 陈灵丽 田 梅 马 青 周晓春 马丽娜 崔光红 曹俊岭

    1.北京中医药大学东方医院药学部，北京 100078；2.安徽省食品药品检验研究院中药所，安徽合肥 230051；3.中国中医科学院中药资源中心，北京 100700；4.北京中医药大学东直门医院洛阳医院，河南洛阳 471002

    乌头是乌头属植物中最具代表性的药用植物，药用历史悠久，中药川乌和附子来源分别为其干燥母根及子根的加工品，具有回阳救逆、补火助阳及祛风止痛的功效[1]。二萜生物碱是其发挥临床作用的物质基础，尤其以良好的镇痛、祛风湿、抗心律失常及局部麻醉、降血压、抗菌、抗癌等活性备受关注[2-7]。在我国，乌头的人工栽培历史约有1 000 年，乌头栽培时保留摘尖(打顶)、掰芽、修根等工序，是主产地四川江油延续千年传统生产工艺。乌头打顶工艺减少了开花对植株的养分争夺，利于根部生长[8-9]。课题组前期研究发现，乌头不同部位二萜生物碱类成分存在组织特异性，尤其是乌头非药用部位顶叶蕴含丰富的特异性二萜生物碱[10]。然而，乌头顶叶及不同叶片中次生代谢产物如何分布？打顶的工艺对乌头的次级代谢产物又产生哪些影响？这些问题鲜见报道。

    本研究采用UPLC-Q-TOF-MS 技术，对乌头顶叶及不同部位的叶片(前6 片叶)，顶叶摘除前后根进行检测，阐述乌头的物质基础及不同部位中次生代谢产物的分布情况，为阐述乌头打顶工艺的科学内涵提供重要的依据。同时，结合不同二萜生物碱在不同部位的变化情况为乌头顶叶资源的可持续利用提供物种基础。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器与试液

    Acquity UPLCTMsystem，Waters Xevo G2-S Q-TOF质谱仪(美国，Waters)；使用的Q-TOF 质谱仪是Synapt质谱系统(美国，Waters)；XS105 型十万分之一电子天平(瑞士METTLER TOLEDO 公司)；Centrifuge5415D型离心机(德国，Eppendorf 公司)；Millipore 纯水系统(美国millipore 公司)。MM400 球磨仪(Retsch 公司)；粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)；FDU-1110 真空干燥机(东京理化器械株式会社)；SB-800-DTD 型超声清洗机(超声功率500 W ......