吴昭蓉 杨素芳 李文意 陈少锋 滕红丽 赵湘培

    广西中医药大学附属国际壮医医院壮瑶医药研究实验室，广西南宁 530201

    我国育龄夫妇的不孕不育率已升至12%～18%，其中40%女性不孕症与卵巢早衰(prematureovarianfailure，POF)有关[1-2]。POF 不仅降低育龄妇女的生育能力，还能导致自身免疫性疾病、骨质疏松症等疾病的发生[3-4]。目前POF 治疗手段如激素替代疗法、免疫抑制剂，均伴随较严重的不良反应，而干细胞治疗、靶向基因治疗等技术复杂，多数尚处于实验室研究阶段[5-10]。因此，找到更安全有效的POF 治疗方法是妇产科学领域的重要目标。传统医药治疗POF 在临床上取得较好的效果且毒副作用较小，壮医民间验方及现代研究均证实蒲公英的显著疗效[11-21]。本研究利用网络药理学技术及体外实验探索蒲公英治疗POF 的作用机制，从而为其更为深入的研究指明方向。

    1 材料与方法

    1.1 网络药理学分析

    1.1.1 蒲公英的化学成分及作用靶点 从文献中收集蒲公英活性成分，借助中药系统药理学数据库与分析平台、STITCH、BATMAN-TCM、GEO、中药研究数据库、Bindingdb、DAVID 数据库预测相应的作用靶点，并采用Cytoscape 3.7.1 软件构建活性成分-靶点网络图。

    1.1.2 POF 靶点预测 以POF 为关键词，以人类基因为研究对象，从OMIM、DrugBank、GeneCards 数据库检索POF 相关靶点。

    1.1.3 网络构建与富集分析 利用维恩图分析将蒲公英主要化学成分作用靶点与POF 靶点数据集进行交集，并构建蒲公英-化学成分-靶基因-POF 网络图。利用String 数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用分析。利用Cytoscape 3.7.1 软件对蒲公英治疗POF 的关键靶点基因进行KEGG 通路富集分析。

    1.2 体外实验验证

    1.2.1 试药与仪器 蒲公英甾醇(纯度>98% ......