大黄酸对脂多糖诱导小胶质细胞极化表型及相关炎症因子的影响
货号,1材料与方法,2实验方法,3统计学方法,2结果,1大黄酸干预后HMC3增殖情况,2细胞形态情况,3流式细胞术检测细胞中CD86+和CD206+的比例情况,4大黄酸干预后各组IL-1β,TNF-α
李 倩 陈 臣 胡 燕 谢晓林 刘 涛新疆医科大学第四临床医学院,新疆乌鲁木齐 830000
脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)为急性脑血管病的一种类型,预后很差,严重威胁人类健康及社会生产力[1-2]。在我国,ICH 所占比例很高,明显高于西方国家,且给社会及家庭带来沉重的经济负担[3-4]。ICH 后的炎症反应是继发性脑损伤的重要因素,小胶质细胞被认为是最早激活的炎症效应细胞,活化的小胶质细胞有M1 和M2 两种表型,不同表型的小胶质细胞起着损伤和保护的双重作用,但这一双重作用的病理改变及其具体机制尚不明确[5-6]。动物实验研究发现,大黄能明显改善急性期ICH 大鼠的神经功能缺损评分[7-8]。因此,本研究采用大黄的有效成分大黄酸,探讨该药对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小胶质细胞极化表型及相关炎症因子的影响。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验细胞及药物 小胶质细胞购于武汉普诺赛生命科技有限公司,小胶质细胞培养环境:MEM、10%FBS 及1%PS,37 ℃,5%CO2,饱和湿度。大黄酸购于上海麦克林生化科技有限公司(货号:R817294)。
1.1.2 主要试剂与仪器 胎牛血清[苏州依科赛生物(ExCell Bio)科技股份有限公司,货号:FND500];MEM培养基(美国Gibco 公司,货号:FND500);肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒(杭州联科生物技术有限公司,货号:70-EK182-96);白细胞介素(interleukin,IL)-6 ELISA试剂盒(杭州联科生物技术有限公司,货号:70-EK106/2-96);IL-1β ELISA 试剂盒(杭州联科生物技术有限公司,货号:70-EK101B-96);一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)试剂盒(南京建成生物工程研究所,货号:A014-1);Anti-Human CD86(B7-2)PE(杭州联科生物技术有限公司 ......
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