BCG激活的淋巴细胞对膀胱肿瘤细胞株TBC-1杀伤作用的实验研究
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【摘要】目的研究BCG激活的淋巴细胞对膀胱肿瘤细胞株TBC-1的杀伤作用。方法分离人外周血中的淋巴细胞，分别经BCG和IL-2刺激，检测淋巴细胞的增殖及其对TBC-1的杀伤活性。结果
BCG刺激的淋巴细胞于不同效靶比40∶1、20∶1、10∶1对TBC-1的杀伤活性分别为(42.36±3.86)%、(29.19±2.39)%、(14.36±1.68)%。结论BCG刺激的淋巴细胞对膀胱肿瘤细胞株TBC-1有杀伤作用。
【关键词】膀胱肿瘤;卡介苗;淋巴细胞
BCG为结核杆菌的减毒活疫苗，其主要成分是卡介苗核糖核酸，具有很强的非特异性免疫刺激作用，BCG可刺激人单个核细胞产生IL-2、IL-12、IL-6和IFNγ20,诱导辅助性T淋巴细胞(Th)、B淋巴细胞、天然杀伤细胞(NK)、活化的淋巴细胞、树突状细胞(dendriticcell，DC)表面的MHC.I类分子和协同刺激分子的表达均明显上调,其诱导的机体免疫反应是一种典型的Thl型免疫反应。
本实验以活BCG刺激人外周血中的淋巴细胞，IL-2扩增诱导产生抗膀胱肿瘤效应细胞，研究BCG激活的淋巴细胞对膀胱肿瘤细胞株TBC-1的杀伤作用。
1材料和方法
1.1BCG激活的淋巴细胞和LAK细胞的培养及增殖的测定
新鲜外周静脉血10ml，梯度密度离心法提取单个核细胞,静置1h，去除单核细胞，台盼蓝染色，活细胞数大于95%者，用含10%人AB血清的RPMI-1640完全培养基调整细胞浓度为1.0×106/ml。分别按7.5ug/ml(3.75×104CFU/ml)加入活BCG，按500u/ml加入IL-2，置37℃、5%CO2饱和湿度下培养，3d换液1次，于第7天更换含IL-2500u/ml的RPMI-1640培养基，继续置37℃、5%CO2饱和湿度下培养，每3d换液1次，于14d收获BCG激活的淋巴细胞，于7d收获LAK用于实验。继续培养，分别培养至30d，测定活细胞数。
1.2BCG激活的淋巴细胞和LAK细胞对TBC-1的细胞毒作用测定
计算不同效靶比40∶1、20∶1、10∶1BCG激活的淋巴细胞和LAK细胞对TBC-1的杀伤活性(MTT法)用酶标仪在检测波长492nm ......
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