1.2.4 硝酸银染色 剥离凝胶，蒸馏水短暂洗涤2次后进行硝酸银染色，基本步骤为40%乙醇+10%冰乙酸固定30 min；30%乙醇+6.8%醋酸钠+5%硫代硫酸钠+0.125%戊二醛敏化30 min；蒸馏水洗涤3次，每次 5 min；0.25%硝酸银+0.074%甲醛染色20 min；蒸馏水洗涤2次，每次1 min；2.5%碳酸钠+0.074%甲醛显影至斑点清晰,然后迅速用1.46%乙二胺四乙酸二钠终止显影10 min；蒸馏水洗涤3次，每次5 min；Image Scanner扫描仪扫描凝胶获取图谱。最后将凝胶置40%乙醇+4.6%甘油中保存。

    1.2.5 胶体考马斯亮蓝染色 参照Candiano等的方法进行^[1]。剥离凝胶，蒸馏水短暂洗涤两次后放入胶体考马斯亮蓝染液(0.12%考马斯亮蓝G-250+10%硫酸铵+10%磷酸+20%甲醇)水平摇床上染色12 h，然后蒸馏水洗涤至背景清晰。Image Scanner扫描仪扫描后凝胶至4℃保存。

    1.2.6 图像分析 应用Image Scanner 扫描仪扫描染色的2-DE胶，以PDQuest 2-DE图像分析软件比较分析两种染色方法所获得SGC7901与SGC7901/VCR 细胞二维凝胶图谱的差异,为进一步改进优化实验提供信息。

    2 结果

    2.1 蛋白质浓度的测定 按照2-DE蛋白定量试剂盒说明测得的标准品及样品蛋白质吸光度、标准曲线及吸光度见表1和图1 ......