3种中草药体外抑菌疗效比较的实验研究

http://www.100md.com 2010年9月25日 刘 海

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     【摘要】 目的 研究秦皮、黄莲、黄柏3种中草药对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、伤寒沙门菌、绿脓杆菌和链球菌等菌的抗菌能力。 方法 用金黄色葡萄球菌和大肠杆菌等5种菌进行受试,并且使用常见的中药药敏,进行打孔的办法来对这三种中草药水煎药剂的抑菌圈进行大小测定。 结果 测定后发现这3种中草药对5种受试菌能够产生不同程度的抑制能力,其中黄莲对这5种受试菌抑菌效果是最佳的,秦皮稍微差一些,黄柏是当中最差的。结论 进行体外实验能够对受试菌产生程度不同的抑制作用。

    【关键词】 中草药;体外抑菌疗效;比较实验研究

    我院对黄莲、秦皮和黄柏3种中草药对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌等5种细菌实行体外的抑菌性实验,现报告如下。

    1 资料与方法

    1.1 实验材料 ①菌种:链球菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等均是由学校的微生物实验室来进行提供的;②中草药:均从武汉市购买的;③试剂:营养琼脂是由杭州天和微生物试剂有限公司生产的。

    1.2 实验方法

    1.2.1 中草药药液制备 使用传统煎煮法分别对黄柏、秦皮、黄莲等这三种中草药5 g稍微进行粉碎以后,使用纱布来包好,制作成单睐煎剂。制法:将用纱布包裹好的中草药分为三味分别盛在烧杯之中,分别加入水100 ml在实行浸泡1 h以后慢慢加热直到煮沸,使用小火10～30 min,然后过滤,将过滤后的药渣再加上大约20 ml水,按先前的办法来实行煎煮过滤,将2次煎液合并以后再进行过滤,将过滤液实行浓缩直至为5 ml,其浓度控制为1 g/ml,用瓶子装好备用。离心3000 r/min,离心20 min以后取上清液,用50的枸椽酸钠调pH值为7.2～7.6之间,倒入无菌试管之中,8磅15 min实行灭菌,最后取出放置在4℃冰箱之中进行保存,以备使用[1]。

    1.2.2 菌液制备 实验菌需要从生长在营养琼脂斜面上来取,接种在液体的培养基。在37℃中培养12 h。经过比浊判定菌量以后,然后进行稀释到其含菌量为105～106cfu/ml的菌悬溶液可以作为实验用的目标菌液。

    1.2.3 MH琼脂培养基制备 将基础培养基分别装在比较合适的三角瓶之中,121℃高压下实行灭菌15 min。需要再无菌的条件下进行操作.基础培养基的温度控制在约为45℃时倒入平皿之中。链球菌使用的是含量为5%(V/V)的绵羊血MH琼脂。

    1.3 体外药物敏感实验 在营养琼脂的平面板之上,使用无菌接种环蘸取一定量的目标菌液放置在琼脂表面进行均匀涂布,然后再使用用直径大约为0.15 cm的打孔器在培养基表面上打等距离的孔一共3个。使用无菌操作以便将灭菌用的不锈钢圆形小管(内径为6nm、外径为8nm、高为10nm的小管),安放在培养基之上,用手轻轻进行加压,使不锈钢小管和培养基表面接触时不产生空隙,并且要在圆形小管上面标注三种中草药物的名称。每一个平板可以安放3支圆形小管。等待1 min之后,然后分别向各个圆形小管用1.5 ml的无菌注射器慢慢滴加1 g/ml的中草药的提取液的各种药液,不要使药液外溢.每一种药液需要做3个平皿,放置在37℃生化培养箱之中培养大约18～24 h,并测量抑菌圈的实际直径,计算出3个平皿平均数值。

    2 结果

    结果显示,3种中草药对这5种受试菌都能够产生不同程度的抑制作用,参见表1。

    抑菌圈直径为<10 mm时是耐药(一),10～15 mm时是为中度敏感(+),15 mm以上则为高度敏感(++)。结果显示,黄莲对五种菌的抑菌效果较好。其他中草药则对这5种受试菌的抑菌效果比较差或根本没有抑制的作用。

    3 讨论

    结果显示,黄莲提取液能够对金黄色葡萄球菌产生的抑菌作用强于黄柏。黄莲对金黄色葡萄球菌呈现出高度的敏感,秦皮的提取液则对金黄色葡萄球菌具有明显的抑制作用;而秦皮提取液对伤寒沙门菌的抑菌效果最强;3种中药对伤寒沙门菌的抑菌圈均在15 mm以上[2]。上述具有抑菌作用的药物都是经常使用的内服药物[3]。这些药物能够对大肠杆菌,伤寒杆菌和绿脓杆菌产生的感染起到防治和治疗方面的作用,而黄莲对金黄色葡萄球菌作用最为明显,在临床中可用于治疗热毒、泄泻痢疾、高热烦躁、痈疽疔毒、口疮等病症,并且能够迅速的止痛、消炎解毒预防感染、收敛防溃、止血生肌,化腐生肌、修复刨面、消肿排脓,还具有有抑菌和抗病毒、抗原虫等作用 ......

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