扶正益津汤对放疗所致免疫功能抑制小鼠细胞毒功能的影响
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【摘要】 目的 观察扶正益津汤对放疗所致免疫功能抑制小鼠细胞毒功能的影响。方法 以小鼠腹腔巨噬细胞介导的肿瘤细胞溶解作用(MTC)和抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)为指标，观察中药扶正益津汤对小鼠巨噬细胞细胞毒活性的影响。结果 扶正益津汤对受X射线照射所致免疫功能抑制小鼠细胞毒活性有显著增强作用。结论 扶正益津汤可用于放疗辅助用药。
【关键词】
细胞毒活性；免疫调节；巨噬细胞
本文将以小鼠腹腔巨噬细胞介导的肿瘤细胞溶解作用(MTC)和抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)为指标，观察中药扶正益津汤对放疗所致免疫功能抑制小鼠细胞毒活性的影响，探讨其免疫调节机制和防治肿瘤作用的机理。现将结果报告如下。
1 材料与方法
11 YAC1细胞株 由吉林大学基础医学院卫生部免疫学重点实验室惠赠；RPMI 1640培养基(日本)含10%灭活FCS、HEPES 2 mmol/L、Lglutamin 2 mmol/L、penicillin 100u/ml、streptomycin 100 μg/ml；125IUdR、Na51Cr04均购自北京原子能研究所，放射性浓度分别为272~336 μCi/ml和112~147 μCi/ml；兔抗鸡红细胞血清为吉林省肿瘤防治研究所自制，凝集效价为1∶1120；ADCC效价为1∶2400。
12 实验动物 健康昆明系小鼠，6~12周龄，雌雄兼用。由吉林大学实验动物部提供。
13 受试药 扶正益津汤主要由黄芪、女真子等组成，按吉林省肿瘤防治研究所常规方法煎制，水浴浓缩，每100 ml含生药量24 g，置4℃冰箱备用。
14 实验分组 将动物按体重随机分为正常对照组(NS)，放射治疗组(Rd)，受试药物组(FY)，放射治疗加受试药物组(Rd+FY)。NS组每天每只小鼠给生理盐水04 ml，连续灌胃7 d；Rd组于实验开始当日给予X射线全身照射，采用SiemeneX射线治疗机，将小鼠放入30 cm×30 cm×20 cm纸盒内，小鼠在盒内呈分散状态，源距小鼠100 cm，射野为30 cm×30 cm，剂量率为2 gy/min，总剂量率为6 gy，一次性全身照射； FY组每天每只小鼠灌胃给药扶正益津汤04 ml(02 ml/10 g体重),连续给药7 d；Rd+FY组，扶正益津汤给药及照射方法同上。
15 腹腔巨噬细胞制备见文献[1]。
16 YAC1细胞标记见文献[2]。
17 鸡红细胞(CRBC)标记 取自来亨鸡翅静脉血，生理盐水洗2次，PBS 悬浮，按文献[3]即刻标记。效靶比值为20∶1。
18 小鼠腹腔巨噬细胞介导的肿瘤细胞溶解作用(MTC活性)测定和抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC活性)测定：测定方法见文献[1]并稍加改进。把标记的51Cr·CRBC，与抗血清在室温下共育30 min，加至贴有巨噬细胞的孔中。自然释放组和最大释放组直接加51Cr·CRBC，不加抗血清和巨噬细胞。效靶比为1∶1。数据处理采用DAS软件进行组间比较。
2 结果
21 扶正益津汤对小鼠腹腔巨噬细胞介导的MTC活性的影响见表1。
由表1可见，FY组MTC活性略高于正常对照组，组间差异无统计学意义(P>005)。而Rd组MTC活性明显低于正常对照组；当服用扶正益津汤后，MTC活性明显增高，与Rd组比较差异有统计学意义P<005。结果表明，扶正益津汤能拮抗放射治疗引起小鼠腹腔巨噬细胞介导MTC活性的抑制作用，但对免疫功能正常小鼠MTC活性作用较小。
22 扶正益津汤对小鼠腹腔巨噬细胞介导的ADCC活性影响见表2。
由表2可见,扶正益津汤给药组ADCC活性最高，但与正常对照组比较，无显著差异；放射治疗组ADCC活性最低，与正常对照组比较有显著性差异；加服扶正益津汤后，与放射治疗组比较，ADCC活性升高显著，差异有统计学意义(P<005)。
3 讨论
多数肿瘤患者在接受化疗、放疗过程中，往往会出现WBC数降低，免疫功能下降，恶心、呕吐等副反应，严重者可影响放化疗的进行，给临床治疗工作带来困难。因此，开展扶正中药的实验研究，重视中医中药在肿瘤防治中的作用，对提高肿瘤临床治疗具有十分重要的意义。
扶正益津汤对小鼠腹腔巨噬细胞介导的ADCC和MTC细胞毒活性有提高作用，可使因放射治疗作用引起免疫功能抑制小鼠细胞毒活性显著增强。由此提示我们，扶正补益中药增强免疫能力作用的机理可能来自于其调整肿瘤患者的免疫机能以达到抗癌之目的。
扶正益津汤对正常小鼠腹腔巨噬细胞细胞毒功能的影响不甚明显，虽有增强趋势，但无统计学意义。其机理可能与扶正中药“虚则补之，损则益之”作用有关。上述结果说明，扶正益津汤具有免疫调节作用，即对放疗引起的免疫功能抑制小鼠细胞毒活性有增强作用。提示，扶正中药可能是通过增强机体免疫功能来达到抗癌祛邪作用的。
参考文献
[1] 龚守良实验基础医学实验技术长春:吉林科学技术出版社,1991：196199.
[2] 于永利人参花总皂甙在体外对小鼠NK细胞活性的影响中国免疫学杂志，1985,1(2)：28.
[3] 翁惠如K细胞的检测临床免疫学检验(上册).上海:上海科学技术出版社,1983,107., http://www.100md.com(齐忠志 付勤)