肝细胞生长因子对结缔组织生长因子刺激下肾小管上皮间质纤维化的影响
印迹,电泳,1材料和方法,2结果,3讨论
王昆 吴阳 杨昱 刘超结缔组织生长因子(CTGF)作为TGF-β的下游效应介质,在高糖血症-转化生长因子β(TGF-β)-CTGF-肾间质纤维化模式中起着重要的作用。而阻断CTGF导致的肾小管间质纤维化将有效延缓糖尿病肾病的发展。
研究表明[1],肝细胞生长因子(HGF)在糖尿病肾病发展过程中存在着潜在的治疗作用。而目前,多数研究均着重于HGF阻断TGF-β所致的肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞纤维化,但对于CTGF在阻断上述过程中的作用并不明确。本实验先前的研究表明HGF对CTGF的表达有抑制作用,如能证明其对CTGF所致肾小管上皮细胞纤维化过程亦有阻断作用将进一步为HGF治疗糖尿病肾病提供有效证据。
本试验将通过观测rhHGF对CTGF刺激下肾小管上皮间质纤维化的影响来进一步探讨HGF在此过程中的具体作用。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 细胞培养试剂HKC细胞株,重组人HGF(rhHGF,Peprotech公司,美国)和重组人CTGF(rhCTGF,Peprotech公司,美国)。
1.1.2 RT-PCR试剂Trizol(Gibco,美国),逆转录试剂盒(Promega,美国),PCR试剂盒(Promega,美国),聚合酶链反应引物(英骏生物技术,中国)。
1.1.3 Western印迹法试剂分光光度仪(Pharmacia Biotech ......
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