浅析决明子降血脂的有效成分
【摘要】 目的 简要分析决明子降血脂的有效成分。方法 将决明子研成粗粉,按系统溶剂提取法制取决明子正丁醇提取物。将决明子的正丁醇提取物上AB-8大孔吸附树脂,依次通过水、20%乙醇、80%乙醇洗脱,得到80%乙醇洗脱物。然后将洗脱物分别经过硅胶柱和氯仿-甲醇梯度洗脱,分段收集。然后将分段收集液经过硅胶柱层析(石油醚一丙酮梯度洗脱)、Spehadex LH-20柱层析(甲醇一水梯度洗脱)、C18柱层析(甲醇一水梯度洗脱)得到六种化合物。最后通过运用低密度脂蛋白受体(LDLR)报告基因模型对六种化合物的有效成分进行分析。结果 化合物Ⅱ能明显增强荧光素酶的活性,说明其能明显增强低密度脂蛋白的基因表达,从而有效的降低血脂含量。结论 化合物Ⅱ(橙黄决明素)为决明子降血脂的有效成分。
【关键词】
决明子;降血脂;有效成分
决明子为豆科植物决明或小决明的干燥成熟种子,最早记录于《神农本草经》,现被2005年版的《中国药典》收载。决明子归属肝、肾、大肠经,其性甘、苦、咸、微寒。中药学记载其具有清肝明目,润肠通便的功效。近年来研究证实决明子具有确切的降血脂的作用,其复方制剂在临床上已得到广泛应用。但是决明子降血脂的有效成分尚不确切,这在一定程度上限制了对决明子制剂的研究和开发[1]。本研究旨在浅析决明子降血脂的有效成分,为决明子制剂的开发利用提供质量控制指标。
, 百拇医药
1 资料与方法
1.1 材料和仪器
决明子购置于当地中药店,经鉴定为豆科植物决明的干燥成熟种子。柱层析硅胶(100~200目、200-300目)、薄层层析硅胶,均产自青岛海洋化工集团有限公司;AB-8大孔吸附树脂为天津南开大学化工厂生产;红外光谱仪、反相薄层板(RPl8)、质谱仪、核磁共振仪均为进口设备。SwG-4显微熔点测定仪为上海精密科学仪器有限公司生产(温度计未校正)。高效液相色谱仪、UV-VIS 8500分光光度计为无锡科达仪器厂生产。YWG-C14H37(液相色谱固定相,10~30 μm)、sephadex LH-20采购自天津化学试剂二厂色谱技术开发公司。高效液相色谱用甲醇为色谱纯,其余所有试剂均为分析纯,水为重蒸馏水。
1.2 方法
将决明子药材研成粗粉,按系统溶剂提取法,制的决明子正丁醇提取物。将决明子的正丁醇提取物上AB-8大孔吸附树脂,依次通过水、20%乙醇、80%乙醇洗脱,得到80%乙醇洗脱物[2]。然后将洗脱物分别经过硅胶柱和氯仿-甲醇梯度洗脱,分段收集,其中氯仿-甲醇(9∶1)收集的洗脱物为组分1,氯仿-甲醇(4∶1)收集的洗脱物为组分2,氯仿-甲醇(3∶1)收集的洗脱物为组分3。组分1经过经硅胶柱层析(石油醚-丙酮梯度洗脱)分离得到化合物Ⅰ和化合物Ⅱ,组分2经过Spehadex LH-20柱层析(甲醇一水梯度洗脱)分离得到化合物Ⅲ和化合物Ⅳ,组分3经过C18柱层析(甲醇一水梯度洗脱)分离得到化合物Ⅴ和化合物Ⅵ。用薄层色谱法和高效液相色谱法对上述六种化合物进行纯度检查,均未见杂质,纯度在95%以上。
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2 结构鉴定
分别用13C-NMR、1H-NMR、UV、IR和MS等对上述六种化合物进行结构鉴定[3]。
化合物Ⅰ经鉴定确定为确定其为钝叶素,即2,8-二羟基-1-甲氧基-3-甲基蒽醌。化合物Ⅱ经鉴定,确定其为橙黄决明素,即2,6,8-三羟基-1,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌。化合物Ⅲ经鉴定确定其为钝叶决明素苷,即2-O-β-D-葡萄糖-8-羟基-1,6,7-三甲氧基-3-甲基蒽醌。化合物Ⅳ经鉴定确定其为钝叶素苷。即2-O-β-D-吡喃葡萄糖-8-羟基-1-甲氧基-3-甲基蒽醌。化合物Ⅴ经鉴定,确定其为大豆苷,即7-O-β-D-吡喃葡萄糖-4-羟基异黄酮。化合物Ⅵ经鉴定,确定其为cassitoroside,即2-乙酰基-3-O-β-D-呋喃芹菜糖-8-O-β-D-吡喃葡萄糖-1,6-二甲氧基奈。
3 有效成分筛选
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对上述六种化合物进行药效学研究分析,通过运用低密度脂蛋白受体(LDLR)报告基因模型分析显示化合物Ⅱ能明显增强荧光素酶的活性,随着化合物浓度的增强荧光素酶的活性也不断升高。此项结果证明化合物Ⅱ能在一定程度上明显增强低密度脂蛋白的基因表达,从而调节低密度脂蛋白的代谢,降低血脂的含量。因此化合物Ⅱ为决明子的有效成分。
4 讨论
决明子具有广泛的药用价值,在我国资源十分丰富。据文献报道决明子的有效成分为蒽醌类、吡酮类和多糖。但对于其具体的有效成分尚缺乏研究,因而限制了决明子制剂的开发和利用。
本研究通过系统溶剂提取法提取出决明子正丁醇提取物,并经过多层分离获得了六种化合物,通过对六种化合物进行有效成分鉴定证明化合物Ⅱ(橙黄决明素),即2,6,8-三羟基-1,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌为决明子的有效成分。其能够显著增强低密度脂蛋白的基因转录水平,有效降低血清中低密度脂蛋白的含量[4]。低密度脂蛋白是血清中胆固醇的一个重要存在形式,化合物Ⅱ能有效调节低密度脂蛋白的代谢,对保持胆固醇在血清中的正常浓度起着非常重要的作用。
, 百拇医药
随着人们生活水平的不断提高,高血脂的发病率也在逐年上升,高血脂易诱发多种疾病,人们对高血脂的危害性的认识不断提高,对降血脂药物的需求也在不断增加。决明子降血脂疗效可靠,资源丰富,是一个不可多得的降血脂药物。研究决明子的有效成分,为决明子制剂提供质量控制指标,对于保证决明子制剂的质量,提高其降血脂的水平大有裨益。对决明子有效成分的研究将大大促进决明子制剂的开发利用。
参 考 文 献
[1] 愈发荣.决明子不同部位提取物的调血脂作用.中国临床康复,2006,17(6):904-906.
[2] 张加雄.决明子降血脂有效部位的化学分成.华西药学杂志,2008,23(6):648-650.
[3] 张加雄.决明子降血脂有效部位的研究.时珍国医国药,2006,17(6):904-905.
[4] 郝延军. 决明子蒽醌类化学成分研究.中草药,2003,34:(1):18-20., 百拇医药(李佰玲)
【关键词】
决明子;降血脂;有效成分
决明子为豆科植物决明或小决明的干燥成熟种子,最早记录于《神农本草经》,现被2005年版的《中国药典》收载。决明子归属肝、肾、大肠经,其性甘、苦、咸、微寒。中药学记载其具有清肝明目,润肠通便的功效。近年来研究证实决明子具有确切的降血脂的作用,其复方制剂在临床上已得到广泛应用。但是决明子降血脂的有效成分尚不确切,这在一定程度上限制了对决明子制剂的研究和开发[1]。本研究旨在浅析决明子降血脂的有效成分,为决明子制剂的开发利用提供质量控制指标。
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1 资料与方法
1.1 材料和仪器
决明子购置于当地中药店,经鉴定为豆科植物决明的干燥成熟种子。柱层析硅胶(100~200目、200-300目)、薄层层析硅胶,均产自青岛海洋化工集团有限公司;AB-8大孔吸附树脂为天津南开大学化工厂生产;红外光谱仪、反相薄层板(RPl8)、质谱仪、核磁共振仪均为进口设备。SwG-4显微熔点测定仪为上海精密科学仪器有限公司生产(温度计未校正)。高效液相色谱仪、UV-VIS 8500分光光度计为无锡科达仪器厂生产。YWG-C14H37(液相色谱固定相,10~30 μm)、sephadex LH-20采购自天津化学试剂二厂色谱技术开发公司。高效液相色谱用甲醇为色谱纯,其余所有试剂均为分析纯,水为重蒸馏水。
1.2 方法
将决明子药材研成粗粉,按系统溶剂提取法,制的决明子正丁醇提取物。将决明子的正丁醇提取物上AB-8大孔吸附树脂,依次通过水、20%乙醇、80%乙醇洗脱,得到80%乙醇洗脱物[2]。然后将洗脱物分别经过硅胶柱和氯仿-甲醇梯度洗脱,分段收集,其中氯仿-甲醇(9∶1)收集的洗脱物为组分1,氯仿-甲醇(4∶1)收集的洗脱物为组分2,氯仿-甲醇(3∶1)收集的洗脱物为组分3。组分1经过经硅胶柱层析(石油醚-丙酮梯度洗脱)分离得到化合物Ⅰ和化合物Ⅱ,组分2经过Spehadex LH-20柱层析(甲醇一水梯度洗脱)分离得到化合物Ⅲ和化合物Ⅳ,组分3经过C18柱层析(甲醇一水梯度洗脱)分离得到化合物Ⅴ和化合物Ⅵ。用薄层色谱法和高效液相色谱法对上述六种化合物进行纯度检查,均未见杂质,纯度在95%以上。
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2 结构鉴定
分别用13C-NMR、1H-NMR、UV、IR和MS等对上述六种化合物进行结构鉴定[3]。
化合物Ⅰ经鉴定确定为确定其为钝叶素,即2,8-二羟基-1-甲氧基-3-甲基蒽醌。化合物Ⅱ经鉴定,确定其为橙黄决明素,即2,6,8-三羟基-1,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌。化合物Ⅲ经鉴定确定其为钝叶决明素苷,即2-O-β-D-葡萄糖-8-羟基-1,6,7-三甲氧基-3-甲基蒽醌。化合物Ⅳ经鉴定确定其为钝叶素苷。即2-O-β-D-吡喃葡萄糖-8-羟基-1-甲氧基-3-甲基蒽醌。化合物Ⅴ经鉴定,确定其为大豆苷,即7-O-β-D-吡喃葡萄糖-4-羟基异黄酮。化合物Ⅵ经鉴定,确定其为cassitoroside,即2-乙酰基-3-O-β-D-呋喃芹菜糖-8-O-β-D-吡喃葡萄糖-1,6-二甲氧基奈。
3 有效成分筛选
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对上述六种化合物进行药效学研究分析,通过运用低密度脂蛋白受体(LDLR)报告基因模型分析显示化合物Ⅱ能明显增强荧光素酶的活性,随着化合物浓度的增强荧光素酶的活性也不断升高。此项结果证明化合物Ⅱ能在一定程度上明显增强低密度脂蛋白的基因表达,从而调节低密度脂蛋白的代谢,降低血脂的含量。因此化合物Ⅱ为决明子的有效成分。
4 讨论
决明子具有广泛的药用价值,在我国资源十分丰富。据文献报道决明子的有效成分为蒽醌类、吡酮类和多糖。但对于其具体的有效成分尚缺乏研究,因而限制了决明子制剂的开发和利用。
本研究通过系统溶剂提取法提取出决明子正丁醇提取物,并经过多层分离获得了六种化合物,通过对六种化合物进行有效成分鉴定证明化合物Ⅱ(橙黄决明素),即2,6,8-三羟基-1,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌为决明子的有效成分。其能够显著增强低密度脂蛋白的基因转录水平,有效降低血清中低密度脂蛋白的含量[4]。低密度脂蛋白是血清中胆固醇的一个重要存在形式,化合物Ⅱ能有效调节低密度脂蛋白的代谢,对保持胆固醇在血清中的正常浓度起着非常重要的作用。
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随着人们生活水平的不断提高,高血脂的发病率也在逐年上升,高血脂易诱发多种疾病,人们对高血脂的危害性的认识不断提高,对降血脂药物的需求也在不断增加。决明子降血脂疗效可靠,资源丰富,是一个不可多得的降血脂药物。研究决明子的有效成分,为决明子制剂提供质量控制指标,对于保证决明子制剂的质量,提高其降血脂的水平大有裨益。对决明子有效成分的研究将大大促进决明子制剂的开发利用。
参 考 文 献
[1] 愈发荣.决明子不同部位提取物的调血脂作用.中国临床康复,2006,17(6):904-906.
[2] 张加雄.决明子降血脂有效部位的化学分成.华西药学杂志,2008,23(6):648-650.
[3] 张加雄.决明子降血脂有效部位的研究.时珍国医国药,2006,17(6):904-905.
[4] 郝延军. 决明子蒽醌类化学成分研究.中草药,2003,34:(1):18-20., 百拇医药(李佰玲)