田曼 祁正亮

    鉴于结节性甲状腺肿发病率逐年上升,相关实验及临床研究也日益受到重视,常用治疗方案中理气消瘿方作为常用中药汤剂,临床治疗中已取得一定应用效果,不过其具体药物生效的分子机制尚未被阐明[1,2]。本文拟采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PI3K/Akt 信号通路中分子蛋白的表达,从细胞内信号转导层面,研究中药理气消瘿方对PI3K/Akt 信号转导途径中相关分子表达的影响和内在规律,从而阐明其治疗结节性甲状腺肿的作用机制,进一步为其临床推广应用提供实验依据。

    1 资料与方法

    1.1 大鼠信息 Wist-ar 雄性大白鼠60 只,自湖北疾病控制中心处购得,许可证号为SCXK(鄂)2015-0018,大鼠平均体重为(223.52±10.25)g。

    1.2 方法

    1.2.1 主要仪器 北京大龙控股有限公司声场的微量移液器,ABI 公司提供的QuantStudio 6 型实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)仪,北京东胜创新生物科技有限公司提供的EDC-810 型PCR 仪。

    1.2.2 处理方法 将60 只大鼠以随机数字法分为空白对照组、消瘿方组、模型组、优甲乐组,每组15 只,实验前置于同一室内环境下饲喂,室温控制在20℃,恒湿50%。

    1.2.2.1 造模 大鼠饲喂14 d 后开始造模,除空白对照组外其余3 组小鼠均给予浓度为0.1%的丙基硫氧嘧啶(PTU)溶液,早晨灌胃1 次,持续灌服8 周,利用多普勒超声完成造模检查,确定造模成功后开始后续试验[3]。

    1.2.2.2 给药 空白对照组：坚持每日进行普通胃喂养并给予生理盐水灌胃,2 次/d,灌胃2～3 ml/次。模型组：完成造模后同样给予生理盐水灌胃,方案与空白对照组一致 ......