雷公藤红素对胃癌细胞体外生长活力及增殖、凋亡基因表达的调节作用
空白对照,1材料与方法,2结果,3讨论
李佳 杨晓丹 刘永叶胃癌是我国发病率最高的消化道恶性肿瘤,由其引起的死亡率居所有恶性肿瘤的第四位。手术切除是目前胃癌的首选治疗手段,联合术后辅助化疗虽然能够延长患者的生存时间,但患者在术后发生肿瘤复发及转移的几率仍高达80%,5 年生存率也仅为30%~40%[1,2]。近年来,中药在恶性肿瘤治疗中的价值受到了越来越高的重视,多种中药具有高效低毒的特点。雷公藤红素(celastrol,Cel)是在中药雷公藤中提取得到的天然活性物,属于醌甲基三萜类化合物,具有广泛的抗肿瘤活性[3]。已有研究报道,雷公藤红素对卵巢癌细胞、结肠癌细胞的体外生长具有抑制作用[4,5],但关于该药物在胃癌治疗中的应用价值尚不明确。为了明确雷公藤红素用于胃癌治疗的潜在价值,本研究具体分析了雷公藤红素对胃癌细胞体外生长活力及增殖、凋亡基因表达的调节作用,具体如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料 胃癌细胞株BGC823 购自ATCC 公司,DMEM 购自Gibco 公司,FBS 购自杭州四季青公司,MTS 细胞生长活力检测试剂盒购自Promega 公司,mRNA 表达检测试剂盒购自北京康为世纪公司。
1.2 实验仪器 细胞培养箱及离心机购自Thermo 公司,酶标仪及PCR 仪均购自Bio-rad 公司。
1.3 实验方法
1.3.1 细胞分组及培养 BGC823 细胞用含有10%FBS 的DMEM 进行常规培养,每2 天更换1 次培养液,待细胞密度生长至80%左右时用胰蛋白酶进行消化、传代;取传代后的第6~10 代细胞进行分组,根据后期处理不同分为空白对照组(用不含FBS 的DMEM处理)和0.5 μmol/L Cel组(用含有0.5 μmol/L雷公藤红素的DMEM 处理)、1.0 μmol/L Cel 组(用含有1.0 μmol/L雷公藤红素的DMEM 处理)、1.5 μmol/L Cel 组(用含有1.5 μmol/L 雷公藤红素的DMEM 处理)、2.0 μmol/L Cel 组(用含有2.0 μmol/L 雷公藤红素的DMEM 处理),各6 株 ......
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