许志晟 朱伯平 黄思聪

    梅毒是由梅毒螺旋体(Treponema pallidum，TP)引起的一种性传播疾病，可通过性接触、输血和垂直传播传播。近年来，梅毒在中国的发病率呈上升趋势。梅毒患者从2005 年的135210 例增加到2014 年的441818 例，增幅超过其他27 例乙类法定传染病，居全国第三位[1]。梅毒可导致神经梅毒、心血管、多系统损伤，甚至死亡。因此，及时诊断和治疗梅毒患者至关重要[2]。梅毒的诊断主要依据临床表现和实验室血清学检查，血清学试验提供了梅毒的推定诊断，它可以分为非密螺旋体试验和密螺旋体试验。非密螺旋体检测主要包括快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、性病研究实验室试验(VDRL)及甲苯胺红血清不加热试验(TRUST)，如果结果为阳性，则进行经确认的密螺旋体检测，如TPPA。近年来，越来越多的实验室开始应用密螺旋体免疫分析，如酶免疫分析(EIA)、化学发光免疫分析(CIA)等。这些方法的灵敏度和特异性都很高，但梅毒检测尚无公认的金标准方法[3]。以往研究表明，TP15 蛋白在梅毒螺旋体中含量丰富，是一种具有较高特异性的外膜蛋白成分，在各期梅毒患者的血清中均能够检测到针对该蛋白的特异性免疫球蛋白G(IgG)抗体[4]。因此，本研究通过基因工程技术克隆表达TP15蛋白，并通过建立ELISA 方法评价其作为诊断抗原的应用价值，为开发和优化新一代梅毒诊断试剂盒提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 TP 模板：梅毒螺旋体Nichols 株基因组DNA 由广州医科大学检验系实验室保存。载体及菌株:原核表达载体pET-28b 及大肠杆菌DH5A、大肠杆菌BL21 (DE3)保存于实验室 ......