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编号:13574424
APC、RAR—β和p16基因甲基化联合DNA异倍体分析对恶性浆膜腔积液的诊断价值(2)
http://www.100md.com 2018年9月1日 《检验医学》 20189
     肿瘤的发生和演化过程往往伴有染色体数量和结构的畸变,因此,检测细胞核 DNA 含量和倍体分布,则可了解正常细胞周期变化及发现恶性增殖的肿瘤细胞。胸腹水中肿瘤细胞核 DNA 倍体的测定是一个独立的、重复性好的、能客观地反映肿瘤生物学行为的定量指标,能使临床医生较客观地对单個细胞核DNA 含量进行检测,且不受细胞蜕变影响,具有较高敏感性和特异性[3] 。本研究拟采用甲基化特异性PCR方法,检测浆膜腔积液沉淀细胞p16、RAR-β和APC基因甲基化状态,以流式细胞分析仪测定细胞核 DNA 倍体,探讨其联合诊断恶性浆膜腔积液的价值。

    材料与方法

    一、样本收集2016年1月到2018年3月,本院住院浆膜腔积患者液85例,其中腹水19例,心包积液11例,,胸水55例。患者入院一周内行穿刺,抽取积液10ml,EDTA抗凝。85例浆膜腔积液中,良性37例,男19例,女18例,年龄21~81岁,中位年龄60岁,均为抗感染或抗结核治疗有效且确诊;恶性48例,男31例,女17例,年龄42~86岁,中位年龄65岁,均经病理及临床检查确诊。

    二、试剂和仪器基因组DNA抽提试剂盒(上海生物工程有限公司);DNA 甲基化修饰和纯化试剂盒(美国ZYMO RESEARCH);DNA引物(上海生物工程公司);PCR Mixture 2×Mix(上海博仕Bio-serve 公司);PCR 扩增仪(PTC200 ......
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