MCP1基因多态对2型糖尿病肾病的影响(1)
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【摘要】 目的 探讨单核细胞趋化蛋白(MCP1)基因调节区A2518G多态性与2型糖尿病肾病之间的关系。方法 运用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术(PCRRFLP)序技术,检测了单纯糖尿病(DN)组76例,糖尿病肾病(DN+)组94例;正常对照(C)82例,252例MCP1基因调节区A2518G多态性。结果 DN+组MCP1G/G基因型频率和G等位基因频率高于DN组、C组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MCP1A2518G多态性与2型糖尿病肾病发病无相关性 。
【关键词】
糖尿病肾病;单核细胞趋化蛋白1;基因;多态性
Study on the correlation of the A2518G polymorphism of MCP1 gene and diabetic nephropathy in type 2 diabetic subjects
CHENG Jie,MO Zhanyu,FENG Yongmin,et al.Department of Nephropathy,Affilliated Hospital of Guangdong Medical College.Zhanjiang 524001,China
【Abstract】 Objective To evaluate the effect of the monocyte chemoattractant protein 1(MCP1)gene A2518G polymorphism on diabetic nephropathy in type 2 diabetic subjects.Methods The 252 cases with type 2 diabetes,including 76 without diabetic complications(DNgroup)and 94 with diabetic nephropathy(DN+group)and 82 healthy controls(C group)were recruited. Polymorphism of A2518G of MCP1 gene was determined.Results There was no significant difference in distribution of allelic and genotype frequencies of MCP1 among DN,DN+and C groups.Conclusion No association exists between the MCP1 A2518G polymorphism and DN onset.
【Key words】
Diabetic nephropathy;Monocyte chemoattractant protein1;Gene;Polymorphism
单核细胞趋化蛋白1(MCP1)是趋化性细胞因子CC亚家族的一个成员,是一条由76个氨基酸残基构成的蛋白单链。MCP1基因是一种小的可诱导基因家族成员之一,其基因启动子部位存在NFκB的结合位点。MCP1的主要功能是趋化和激活单核细胞至炎症部位。研究发现MCP1基因2518G与哮喘[1]、冠状动脉疾病[2]有关。这些发现提示MCP1及其调控区A/G多态在炎症过程中起重要作用。本研究探讨MCP1基因A2518G多态与2型DN的相关性。
1 对象与方法
1.1 研究对象 随机选择在广东医学院附属医院住院T2DM患者170例,病程超过10年,彼此之间无亲缘关系,入选患者无冠心病、心衰、慢性肝脏疾病及其他原因引起的肾脏疾病(如急性肾炎、尿路感染等),同时排除慢性肾功能不全(血cr>176 μmol/L)患者。再根据患者尿白蛋白/肌酐比分为两个亚组:单纯糖尿病组(DN)76例,6个月内连续两次尿白蛋白/肌酐比(UACR)<30 mg/gCer;糖尿病肾病组(DN+)94例,6个月内连续两次UACR≥30 mg/gCer。对照组(C)82例,为健康体检者和志愿者,均无糖尿病、冠心病、高血压、肾病病史。所有研究对象均知情同意。
1.2 方法
1.2.1 临床及生化指标 所有研究对象均询问病史并记录病程;各组试验前禁食12 h以上,空腹抽取静脉血8 ml,2 mlEDTA抗凝血用于抽提基因组DNA,其于用于检测SCRP、HbA1c等临床和生化指标;留取24 h尿,测总尿量,用放免法测定24 h尿微量白蛋白总量。
1.2.2 基因组DNA提取 采用标准的酚氯仿蛋白酶K法提取外周血DNA。MCP12518基因型检测:上游引物5’TCTCTCACGCAGCACTGACC3’及下游引物5’GAGTGTTCACATAGGCTTCTG3’。反应条件:95℃预变性5 min,94℃变性40 s,58℃退火40 s,72℃延伸40 s,最后于72℃延伸7 min ......
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