P53基因家族的表达与结\直肠癌发生及预后关系的研究(1)
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【摘要】 目的 研究P53基因家族(P53、P63、P73)在结、直肠癌组织中的表达,探讨其与结、直肠癌患者发生和预后的关系。方法 选取58例新鲜结、直肠癌组织、50例结、直肠息肉标本,用PCR检测P53基因外显子5,P63基因外显子6,P73基因外显子2进行分子遗传学的检测。结果 43例结直肠癌患者,37例结、直肠息肉组织及P53基因家族均有表达,15例结直肠癌患者,13例结、直肠息肉组织未表达P53基因家族。结论 P53基因家族表达结、直肠癌的发生有密切关系,P53基因家族表达缺失的患者易发生癌变以及预后更差。
【关键词】结、直肠癌;P53; P63; P73; 抑癌基因; 聚合酶链反应
The study on gene expression of p53 、p63、p73 in colorectal tumours and the relations with cancerous and prognosis
XIONG Liang fa,WANG Li,JIA Ling,et al.Department of carcinoma,the first people,s hospital of yunnan province,Kunming 650032,China
【Abstract】 Objective This study was undertaken to investigate theexpression of p53、p63and p73 gene in colorectal cancers,and analysis correlation of p53、p63and p73 with originating and prognosis of colorectal tumors.Methods Using a polymerase chain reaction(PCR)approach,we analysed the expression in exon5 of p53,exon6 of p63,exon2 of p73 in 58 human colorectal cancer and 50 colorectal polypi patients.Results 43of 58 colorectal tumour patients expressed P53 gene group,37 of 50 colorectal polypi patients expressed P53 gene group.Conclusion There was affinity between P53 gene group and the colorectal tumour patients’ prognosis.
【Key words】 p53; p63;p73;Colorectal tumor;Gene;Suppress gene; PCR
云南省第一人民医院肿瘤外科(熊亮发 贾玲 杨昆宪 孙建伟), 麻醉手术科(王莉); 昆明医学院第一附属医院普通外科(段体德)
一直以来,P53基因是肿瘤生物学研究的重点。作为肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene),它的缺失或失活与人类50%以上肿瘤的发生、发展密切相关[1],因而受到人们的广泛关注。1997年后P53基因家族成员相继被发现。Kaghad等首先发现了P53基因的第一个类似基因 P73基因,随后Schmale等以及其他几个研究小组各自独立发现了P53基因家族的第二个基因 P63基因[2]。P53基因家族各个成员在结构和功能上具有相似性,全长表达的P63、P73基因蛋白可激活p53相关靶基因,能触发细胞周期停滞,诱导凋亡,因而认为可能是候选的肿瘤抑制基因[3 5]。但是,P53、P63、P73基因家族表达与结直肠癌之间的关系,目前少见报道。
1 资料与方法
1.1 一般资料
58例结直肠癌标本及癌旁组织标本来自昆明医学院第一附属医院、云南省第一人民医院、云南省肿瘤医院手术切除的新鲜标本;50例结直肠息肉来自昆明医学院第一附属医院结直肠纤维内窥镜室;所有标本从患者体内取出后,不经任何处理,一部分放入液氮中保存备用,另一部分做成石蜡标本。本组病例标本,只选取经术后病理诊断分期为Duke’sC期的结直肠癌患者,并且所有结直肠癌患者术后都使用FOLOFOX4方案化疗6月,治疗后均随访5年。另外40例结直肠息肉患者有6例有癌变或者不典型增生,其余为绒毛状腺瘤和管状腺瘤。
1.2 主要实验用品
1.2.1 蛋白酶K:20 mg蛋白酶K溶解于1 ml灭菌ddH2o中, 20℃保存。
1.2.2 TE缓冲液:10 mmol/L Tris Hcl,1 mmol/L EDTA,pH8。0;灭菌后,4℃保存。
1.2.3 琼脂糖电泳上样缓冲液:0.25 g溴酚兰,0.25%二甲苯青FF,30%甘油水溶液 ......
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