王国富 吴利先 薛士鹏

    志贺菌(shigellosis)又称痢疾杆菌，能侵袭结肠粘膜上皮细胞，引起人类细菌性痢疾。传统的检测方法必须经过分离培养和生理生化鉴定，甚至于全自动细菌鉴定仪等，检测周期长、步骤繁琐、许多因素难以控制，甚至存在误诊和漏诊，已经显现出很大的局限性。因此急需建立快速、敏感、特异的检测方法诊断菌痢，以采取有效防治措施。

    随着微生物基因组学的发展，对志贺菌的基因结构已经清楚，分子生物学检测技术应用于志贺菌快速诊断已经成为可能，本研究在传统检测方法的基础上引入了多重PCR技术，将为临床快速诊断志贺菌提供理论基础。

    1 资料与方法

    1.1一般资料 68株志贺菌来源于2010～2011年大理地区腹泻患者的粪便标本，大肠埃希菌和伤寒沙门菌由本室保存，PCR扩增仪为PE公司产品，PCR试剂盒购自北京晨绿生物公司。PCR所用引物:参照文献针对4个毒力基因设计4对引物，由北京晨绿生物公司合成如下:

    表1 志贺菌多重PCR诊断所用需的4个毒力基因的4对引物

    1.2方法

    1.2.1用鉴定过的志贺菌进行多重PCR 将鉴定过的志贺菌培养过夜 ......