柏美玲 宋昱 林群凡 邓爽 胡少青 伍义行

    石蜡切片是组织病理学制片技术中最为常用的方法，广泛应用于临床诊断和科研教学中。石蜡切片制作涉及取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色、封片等系列步骤，影响因素众多，且不同组织类型具有不同的特点，每个操作环节的失误都将影响切片的最终质量[1]。肝组织具有细胞成分较多、细胞间隙较大、纤维结缔组织较少、质地较脆等特点，肝组织蜡块在切片时易碎裂，染色后常呈脱水和透明过度的表现(如出现大量裂纹等)，从而影响肝组织原始形态结构的观察和结果的判断。而实验动物肝组织石蜡切片在肝病研究、抗肝炎药物药效评价、新药毒理学评价和组织病理教学中起到了十分重要的作用。因此，本文结合自己的研究经验，重点对常见实验动物(大、小鼠)肝组织石蜡切片制作的特点和常见问题进行了分析总结，并提出了相应的解决方法。

    1 取材

    取材组织面积一般为1.5 cm×1.5 cm，厚度不超过0.3 cm，组织太大或过厚时均可降低脱水效果。取大小鼠肝组织时，应先进行放血处理，再解剖取肝组织，以防止肝组织内积血，影响切片效果。因肝组织属于脆弱器官，应小心使用镊子的弯月面移动或夹取器官，防止镊子尖端损伤肝组织造成人为破坏。

    2 固定

    固定的目的在于保存组织内细胞原有的结构和形态。石蜡切片常用固定液有甲醛、乙醇、醋酸、AF液(乙醇+甲醛液)、AAF液(醋酸+乙醇+甲醛液)等，需根据实验材料的性质及制片目的不同，选用适宜的固定液[2]。肝组织切片制作常选择福尔马林作为固定液 ......