不同培养液对鼠胚在新建试管婴儿实验室中体外发育的影响
囊胚,培养箱,1材料与方法,2结果,3讨论
饶金鹏 刘青 钱小红 魏凯 陈剑 金敏 金帆不同培养液对鼠胚在新建试管婴儿实验室中体外发育的影响
饶金鹏 刘青 钱小红 魏凯 陈剑 金敏 金帆
目的利用三种不同的培养液EBSS(SIGMA系列), G1和G2(Vitrolife系列), Quinn’s1026和Quinn’s1029(SAGE系列)对昆明系小白鼠胚胎进行体外培养, 以对新建IVF实验室进行评估。方法取7周龄的昆明白雌性小鼠, 用人绝经期促性腺激素(HMG)10 IU促排卵,48 h后注射人绒毛促性腺激素(HCG)10 IU促卵泡成熟, 同时与雄性小鼠1:1合笼, 再经过48 h后获取形态正常的2细胞鼠胚。将胚胎分成三组, A组使用EBSS(Earle’s Balanced Salt Solution)培养液, B组使用G1和G2培养液, C组使用Quinn’s1026和Quinn’s1029培养液, 三种培养液均添加10%人血清白蛋白。分析对比三组结果。结果72 h后, 鼠胚总体囊胚形成率为71.54%(382/534), 其中A组的囊胚形成率为30.56%(22/72), B组为70.49%(129/183), C组为82.80%(231/279), B、C组的囊胚形成率显著高于A组(P<0.01)。结论通过鼠胚体外培养, 对新建试管婴儿实验室进行了较好的质控检测, 序贯培养液Vitrolife 系列的G1和G2以及SAGE系列的Quinn’s1026和Quinn’s1029在鼠胚囊胚形成率上要高于简单培养液EBSS。
培养液;鼠胚;囊胚;体外培养;质量控制
自1985年Ackerman等首先用2细胞鼠胚来对实验室进行质量控制(quality control, QC), 鼠胚实验(mouse embryo assay, EMA)已成为生殖医学中心胚胎培养室质量评估, 尤其是培养液质量检测最为广泛应用的方法[1]。而培养液对体外胚胎培养的重要性是不言而喻的, 一种优化的培养系统可以支持胚胎在体外或移植后形成囊胚并继而发育成胎儿[1,2]。旨在对新建IVF胚胎培养室进行质量控制, 同时对培养液进行评估, 在为将来开展人类胚胎体外培养时培养液的选择使用上积累实验数据, 本院生殖中心2014年9~12月使用3种不同培养液对昆明系小白鼠进行胚胎体外培养, 并对比分析了3个不同组别之间的4细胞胚胎、8细胞胚胎、融合胚以及囊胚形成率 ......
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