杜凡

    ·实验研究·

    大鼠慢性脊髓损伤模型的建立

    杜凡

    目的探寻简便易行的慢性脊髓损伤模型建立方法,为探索脊髓型颈椎病的损伤机制、病理及进一步为治疗奠定基础。方法56只成年wistar雌性大鼠,随机分为实验组和对照组,各28只。根据大鼠脊柱解剖结构特点自行设计一种大鼠脊髓压迫复合体,用以制作大鼠慢性压迫模型。运用行为学、病理组织观察等方法评价模型的可靠性。结果脊髓压迫后两组大鼠行为学评分(BBB)比较差异有统计学意义(P<0.05)；观察两组病理切片,可见实验组明显出现尼氏体减少,细胞核崩解,神经元坏死、减少,泡沫细胞形成,神经纤维脱髓鞘。结论本方法提供了一种理想的制作鼠慢性脊髓压迫损伤方法。

    脊髓损伤；动物模型；大鼠；病理

    完全复制人的慢性脊髓压迫损伤的动物模型,一直以来是脊髓损伤的理想目标,之前有很多人为之而努力,发明了很多慢性脊髓压迫损伤动物模型的制作方法,比较常用的有脊髓后路植入螺钉[1]、椎管内植入气囊[2]、膨胀物压迫[3]、肿瘤压迫[4]等,本实验采用膨胀物压迫法。现报告如下。

    1 材料与方法

    1.1材料 2013年取56只260～280 g成年wistar雌性大鼠(由中国医科大学动物部提供),随机分为实验组和对照组,每组28只。

    1.2动物模型的制作方法 采用异戊巴比妥10 g/L(40 mg/kg)腹腔麻醉,备皮、消毒、常规消毒铺巾,后正中切口,暴露T6～9椎板,咬除T7、8椎板,见硬脊膜,将粘于钢片下的压迫物置于已暴露硬脊膜的脊髓节段上,并用穿过双侧肋骨的手术线将压迫物牢固的固定在脊柱上,后逐层缝合伤口,每组取4个时间点：2、3、4、6周,每个时间点7只；对照组将膨胀物粘于钢片的背侧后,固定于T7、8节段,即不对脊髓有任何压迫。术后抗炎1周。

    1.3压迫物的制作 10只wistar大鼠进行解剖,根据大鼠T7、8脊髓节段脊椎的平均宽度、双侧椎板的角度制作压迫物的几何形状,压迫物由两部分组成,分别为7.0 mm×7.2 mm ×0.8 mm的不锈钢钢片和5.0 mm×1.5 mm×1.0 mm的膨胀物(主要成分为缓慢膨胀型橡胶)组成,其中钢片是由线切割机(由东北大学实习工厂提供)切割而成,每个均为误差在0.2 mm内的标准几何形状,将其中线处折弯,折弯角度为100°,误差范围在1°；膨胀物主要成分是橡胶的复合材料,经流化为要求的标准尺寸后,将膨胀物粘于钢片内侧,形成一牢固的压迫物。

    1.4行为学评分 术后分别对2、3、4、6周进行大鼠的行为学观察,参照BBB评分标准[2],采取双盲、双人独立观察记录,记录后的结果取均值 ......